赤血球関連コレステロール代謝のメカニズムとその破綻の解明

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K19174
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 大川 龍之介 東京医科歯科大学, 大学院保健衛生学研究科, 助教 (50420203)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 赤血球 / コレステロール代謝 / 高比重リポタンパク

研究実績の概要

・赤血球のコレステロール放出機構の解析
赤血球から血漿へのコレステロール転送のメカニズムをさらに解明するために，蛍光標識したコレステロール（23-（dipyrrometheneboron difluoride）-24-norcholesterol；BODIPY-Chol）を用いた赤血球膜表面のラベリングを試みた．溶媒の濃度を検討することで，赤血球を溶血させずに，膜表面を蛍光標識することに成功した．次に，この蛍光標識赤血球と血漿を混和，インキュベーションを行い，その後の血漿を解析することで赤血球から放出されたコレステロールの動態を追跡した．結果，血漿中の蛍光強度は赤血球とのインキュベーション時間依存的に増加した．さらに，高速液体クロマトグラフィーで血漿中のそれぞれのリポタンパクの蛍光強度を分析したところ，高比重リポタンパク（HDL）と低比重リポタンパク分画に蛍光コレステロールは転送され超低比重リポタンパク分画にはほとんど転送されないことが明らかになった．
・泡沫細胞から赤血球へのコレステロール輸送経路の同定
赤血球によるコレステロール逆転送機構への関与の解析では，昨年度明らかにした泡沫細胞から赤血球へのコレステロールの転送はアポリポタンパクA-IやHDLを介して行われ，赤血球はコレステロール逆転送のプールとしての役割を担っていることが示唆された．
・修飾HDLの作製（血清アミロイドA（SAA）含有HDL）
赤血球-HDL間のコレステロール代謝の破綻について調べるために，修飾HDLの一つであるSAA含有HDLの作製とその性質を調べた．リコンビナントSAAを用いて，SAA含有HDLを作製することに成功し，さらに通常のHDLより抗酸化能が高いことが明らかになった．今後，上記の赤血球とHDLの作用に関して，作製した修飾HDLを用いてその影響について調べる．

研究成果

• [国際共同研究] Chulalongkorn University(Thailand)
  • 国名: タイ
  • 外国機関名: Chulalongkorn University
• [雑誌論文] High-Density Lipoprotein Binds to Mycobacterium avium and Affects the Infection of THP-1 Macrophages. (2016)
  • 著者名/発表者名: Naoya Ichimura, Megumi Sato, Akira Yoshimoto, Kouji Yano, Ryunosuke Ohkawa, Takeshi Kasama, Minoru Tozuka
  • 雑誌名: J Lipids 巻: 2016 ページ: 4353620
  • DOI: 10.1155/2016/4353620
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Cholesterol Efflux Capacity of Apolipoprotein A-I Varies with the Extent of Differentiation and Foam Cell Formation of THP-1 Cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kouji Yano, Ryunosuke Ohkawa, Megumi Sato, Akira Yoshimoto, Naoya Ichimura, Takahiro Kameda, Tetsuo Kubota, Minoru Tozuka
  • 雑誌名: J Lipids 巻: 2016 ページ: 9891316
  • DOI: 10.1155/2016/9891316
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effects of serum amyloid A on the structure and antioxidant ability of high-density lipoprotein. (2016)
  • 著者名/発表者名: Megumi Sato, Ryunosuke Ohkawa, Akira Yoshimoto, Kouji Yano, Naoya Ichimura, Madoka Nishimori, Shigeo Okubo, Yutaka Yatomi, Minoru Tozuka
  • 雑誌名: Biosci. Rep. 巻: 36 ページ: e00369
  • DOI: 10.1042/BSR20160075
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Paraoxonase 1 associated with high-density lipoprotein transfers to oxidized low-density lipoprotein depending on the degree of oxidation. (2016)
  • 著者名/発表者名: Akira Yoshimoto, Ryunosuke Ohkawa, Kouji Yano, Megumi Sato, Naoya Ichimura, Yoko Usami, Akari Miyazaki, Mitsutoshi Sugano, Takeshi Uehara, Minoru Tozuka
  • 雑誌名: Int J Anal Bio-Sci 巻: 4 ページ: 99-109
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] 赤血球はアポリポタンパクA-Iによる泡沫細胞からのコレステロール引き抜きに関与している． (2017)
  • 著者名/発表者名: 賴 劭睿，大川 龍之介，矢野 康次，佐藤 恵美，吉本 明，戸塚 実．
  • 学会等名: 第27回生物試料分析科学会年次学術集会．
  • 発表場所: 朱鷺メッセ新潟コンベンションセンター（新潟）
  • 年月日: 2017-02-11 – 2017-02-12
• [学会発表] コレステロール引き抜き能評価は細胞の分化・泡沫化の程度に大きく影響を受ける． (2017)
  • 著者名/発表者名: 矢野 康次，大川 龍之介，佐藤 恵美，吉本 明，市村 直也，亀田 貴寛，窪田 哲朗，戸塚 実．
  • 学会等名: 第27回生物試料分析科学会年次学術集会．
  • 発表場所: 朱鷺メッセ新潟コンベンションセンター（新潟）
  • 年月日: 2017-02-11 – 2017-02-12
• [学会発表] 低比重リポタンパクおよび高比重リポタンパクコレステロール試薬の両方に異常反応を示した一症例． (2016)
  • 著者名/発表者名: 佐藤 恵美，大川 龍之介，島野 志都子，吉本 明，矢野 康次，泉山 肇，萩原 三千男，東田 修二，戸塚 実．
  • 学会等名: 第56回日本臨床化学会年次学術集会．
  • 発表場所: くまもと県民交流館パレア（熊本）
  • 年月日: 2016-12-02 – 2016-12-04
• [学会発表] Impact of Erythrocyte on the cholesterol metabolism. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohkawa R., Lai SJ., Yoshimoto A., Sato M., Yano K., Tozuka M., Impact of Erythrocyte on the cholesterol metabolism.
  • 学会等名: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • 発表場所: Taipei (Taiwan)
  • 年月日: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • 国際学会
• [学会発表] Erythrocyte is associated with cholesterol efflux from foam cell by apolipoprotein A-I. (2016)
  • 著者名/発表者名: Lai SJ., Ohkawa R., Yano K., Sato M., Yoshimoto A., Tozuka M.,
  • 学会等名: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • 発表場所: Taipei (Taiwan)
  • 年月日: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • 国際学会
• [学会発表] Oxidized low-density lipoprotein receives antioxidant enzyme paraoxonase 1 from high-density lipoprotein. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshimoto A., Ohkawa R., Sato M., Yano K., Tozuka M.
  • 学会等名: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • 発表場所: Taipei (Taiwan)
  • 年月日: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • 国際学会
• [学会発表] Analysis of oxidative susceptibility and fatty acid profile in apolipoprotein E-containing high-density lipoprotein. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ikoma H., Ohkawa R., Yoshimoto A., Yano K., Sato M., Kasama T., Tozuka M.
  • 学会等名: 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress.
  • 発表場所: Taipei (Taiwan)
  • 年月日: 2016-11-26 – 2016-11-29
  • 国際学会
• [学会発表] Modification of apolipoprotein A-I in high-density lipoprotein by myeloperoxidase and chymase. (2016)
  • 著者名/発表者名: Morita M., Ohkawa R., Satou M., Yoshimoto A., Yano K., Kasama T., Tozuka M.
  • 学会等名: The 32nd World Congress of Biomedical Laboratory Science.
  • 発表場所: Kobe (Japan)
  • 年月日: 2016-08-31 – 2016-09-04
  • 国際学会
• [学会発表] Effect of SAA on the antioxidant ability of HDL. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sato M., Ohkawa R., Yoshimoto A., Yano K., Okubo S., Yatomi Y., Tozuka M.
  • 学会等名: American Association for Clinical Chemistry (AACC) 2016 Annual Meeting and Clinical Lab Expo.
  • 発表場所: Philadelphia (USA)
  • 年月日: 2016-07-31 – 2016-08-04
  • 国際学会
• [学会発表] Effect of differentiation and foam cell formation on cholesterol efflux capacity of apolipoprotein A-I. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yano K., Ohkawa R., Sato M., Yoshimoto A., Kubota T., Tozuka M.
  • 学会等名: American Association for Clinical Chemistry (AACC) 2016 Annual Meeting and Clinical Lab Expo.
  • 発表場所: Philadelphia (USA)
  • 年月日: 2016-07-31 – 2016-08-04
  • 国際学会