Rnf213変異体トランスジェニックマウスによるもやもや病モデル開発

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K19243
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 小林 果 京都大学, 医学研究科, 助教 (70542091)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: もやもや病 / RNF213 / ノックアウトマウス / トランスジェニックマウス

研究実績の概要

近年、もやもや病の感受性遺伝子としてRNF213が同定され、p.R4810K多型が東アジアの患者において非常に強い相関を示すことが証明された。本研究では、血管内皮あるいは平滑筋細胞特異的にRNF213変異体を過剰発現するTgマウスを作成し、もやもや病で認める狭窄性の変化を再現するモデルマウスを確立することを目的とする。モデルマウス確立を通じて、①RNF213 R4810K 過剰発現が脳血管に与える影響と分子メカニズム、②もやもや病の病態における血管内皮細胞・平滑筋細胞それぞれが果たす役割、③もやもや病発症に関与する環境因子の特定およびその機序を明らかにする。
本年度は血管内皮特異的Rnf213変異体Tgマウス、Rnf213 KOマウス、野生型マウスに対して両側総頸動脈狭窄（BCAS）法による脳低還流処置を行い、脳虚血影響に対するRnf213変異体およびRnf213欠損の効果を検討した。その結果、Rnf213 KOマウスはRnf213変異体Tgマウス、野生型マウスと比較して有意に生存率が低いことが明らかとなった。BCAS実験はすでに終了し、現在撮像したMRIデータ解析および組織学的検討を進行している。
本年度得られた成果はRNF213が脳低還流マウスモデルの死亡率に関与することを示唆しており、脳梗塞を主症状のひとつとするもやもや病の病態に本質的な役割を果たしていることが推測される。今後、BCASマウスモデルの脳血管狭窄、脳血流量、脳梗塞評価を行い、もやもや病のモデルマウスとしての妥当性を検討する。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

計画通りBCAS実験が終了したため。

今後の研究の推進方策

来年度はBCAS実験により得られたMRIデータおよび病理組織を解析し、脳angiogenesi・arteriogenesis、脳血流量、脳実質の梗塞変化などを評価する。

研究成果

• [国際共同研究] Constantine Philosopher University/Comenius University(Slovakia)
  • 国名: スロバキア
  • 外国機関名: Constantine Philosopher University/Comenius University
• [国際共同研究] Charles University/Center of Medical Genetics/Ostrava University(チェコ)
  • 国名: チェコ
  • 外国機関名: Charles University/Center of Medical Genetics/Ostrava University
  • 他の機関数: 4
• [雑誌論文] RNF213 rare variants in Slovakian and Czech moyamoya disease patients (2016)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi H, Brozman M, Kyselova; K, Viszlayova D, Morimoto T, Roubec M, Skoloudik D, Petrovicova A, Juskanic D, Strauss J, Halaj M, Kurray P, Hranai M, Harada KH, Inoue S, Yoshida Y, Habu T, Herzig R, Youssefian S, Koizumi A
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11 (10) ページ: e0164759
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0164759
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] RNF213 Is Associated with Intracranial Aneurysms in the French-Canadian Population (2016)
  • 著者名/発表者名: Zhou S, Ambalavanan A, Rochefort D, Xie P, Bourassa CV, Hince P, Dionne-Laporte A, Spiegelman D, Gan-Or Z, Mirarchi C, Zaharieva V, Dupre N, Kobayashi H, Hitomi T, Harada KH, Koizumi A, Xiong L, Dion PA, Rouleau GA
  • 雑誌名: Am J Hum Genet 巻: 99(5) ページ: 1072-1085
  • DOI: 10.1016/j.ajhg.2016.09.001
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Frequency of RNF213 p.R4810K, a susceptibility variant for moyamoya disease, and health characteristics of carriers in the Japanese population (2016)
  • 著者名/発表者名: Cao Y, Kobayashi H, Morimoto T, Kabata R, Harada KH, Koizumi A.
  • 雑誌名: Environ Health Prev Med. 巻: 21 (5) ページ: 387-390
  • DOI: 10.1007/s12199-016-0549-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Significant Association of the RNF213 p.R4810K Polymorphism with Quasi-Moyamoya Disease. (2016)
  • 著者名/発表者名: Morimoto T, Mineharu Y, Kobayashi H, Harada KH, Funaki T, Takagi Y, Sakai N, Miyamoto S, Koizumi A.
  • 雑誌名: J Stroke Cerebrovasc Dis. 巻: 25(11) ページ: 2632-2636
  • DOI: 10.1016/j.jstrokecerebrovasdis.2016.07.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Infantile Pain Episodes Associated with NovelNav1.9 Mutations in Familial Episodic Pain Syndrome in Japanese Families. (2016)
  • 著者名/発表者名: Okuda H, Noguchi A, Kobayashi H, Kondo D, Harada KH, Youssefian S, Shioi H, Kabata R, Domon Y, Kubota K, Kitano Y, Takayama Y, Hitomi T, Ohno K, Saito Y, Asano T, Tominaga M, Takahashi T, Koizumi A.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 11 (5) ページ: e0154827
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0154827
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification of MMP1 as a novel risk factor for intracranial aneurysms in ADPKD using iPSC models. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ameku T, Kobayashi H 他31名（12番目）
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 6 ページ: 30013
  • DOI: 10.1038/srep30013
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] チェコスロバキアもやもや病患者におけるmysterin遺伝子変異の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 小林果、森本 貴昭、原田浩二、小泉昭夫
  • 学会等名: 第87回日本衛生学会学術総会
  • 発表場所: 宮崎市
  • 年月日: 2017-03-26 – 2017-03-28
• [学会発表] 膵β細胞特異的Tgマウスを用いたMysterinが正常マウス耐糖能に与える影響の評価 (2016)
  • 著者名/発表者名: 小林果、奥田裕子、崔廷米、原田浩二、山根俊介、稲垣暢也、小泉昭夫
  • 学会等名: 第59回日本糖尿病学会年次学術集会
  • 発表場所: 京都市
  • 年月日: 2016-05-19 – 2016-05-21
• [図書] Moyamoya Disease Explored Through RNF213 - Genetics, Pathology and Clinical Sciences. (2017)
  • 著者名/発表者名: Koizumi A, Nagata K, Houkin K., Tominaga T, Miyamoto S, Kure S, Tournier-Lasserve E
  • 総ページ数: 185
  • 出版者: Springer