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2017 年度 実績報告書

高地肺水腫における内皮型一酸化窒素合成酵素遺伝子のシークエンス解析による病態解明

研究課題

研究課題/領域番号 15K19417
研究機関信州大学

研究代表者

小林 信光  信州大学, 医学部附属病院, 助教(診療) (50447752)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード高地肺水腫
研究実績の概要

平成29年度は、前年度に引き続き次世代シークエンサーによる解析を行う準備をおこなうとともに、次世代シークエンサーによる解析を一部で行うと共に、さらに一部の検体で先行してエクソン解析を行った。
平成29年度に新たに得た高地肺水腫発症者群および非発症者群の検体についてQuickGene-800(富士フィルム)による遺伝子抽出を行った。また、新規に得られた遺伝子検体および昨年度中に抽出を終えている遺伝子検体について、次世代シークエンサーによる遺伝子解析に必要なライブラリを作成するために、PCRを行うための濃度調整を追加して行ない、これらの作業は終了した。次の段階である次世代シークエンサーによる遺伝子解析について、遺伝子解析に必要な試薬などについては、昨年度に引き続き、購入を行なった。
次に、次世代シークエンサーによる解析の最初の段階であるライブラリ作成のためのPCRを行ったが、一部でPCRがうまくいかず、追加のPCRプローブを設計し、業者に発注を行ない、現在PCRを継続中である。一部の検体では従来の方法でPCRを行い、ライブラリ作成に成功した。それらの検体については、エマルジョンPCRによりテンプレートを作成し、Ion Torrent Ion TGM システムを用いて、遺伝子配列の決定を行った。先にのべた追加のプローブによるPCRを行い、Ion Torrent Ion TGM システムによる解析を行った時点でまとめて解析を行う予定である。
また、一部の検体については、以前当科で行った研究における臨床データとの比較を行うため、先行してエクソン解析を行い、その結果の解析を試行中である。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2017

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Electron Microscopy Observation of Human Pulmonary Ultrastructure in Two Patients with High-Altitude Pulmonary Edema2017

    • 著者名/発表者名
      YundenDroma,Nobumitsu Kobayashi
    • 雑誌名

      High Alt Med Biol

      巻: 18 ページ: 288-291

    • DOI

      10.1089/ham.2016.0163

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Genetic structure in the Sherpa and neighboring Nepalese populations.2017

    • 著者名/発表者名
      Cole AM,Nobumitsu Kobayashi
    • 雑誌名

      BMC Genomics

      巻: 18 ページ: 102

    • DOI

      10.1186/s12864-016-3469-5

    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] Genetic Variants in PPARA contribute to adaptation to high altitude hypoxia in Sherpas2017

    • 著者名/発表者名
      Fumiya Kinota,Nobumitsu Kobayashi
    • 学会等名
      4th Congress of Asia-Pacific Society for Mountatin Mediccine
    • 国際学会
  • [学会発表] Genetic evidence for high altitude pulmonary edema in Japanese climbers2017

    • 著者名/発表者名
      Nobumitsu Kobayashi
    • 学会等名
      4th Congress of Asia-Pacific Society for Mountatin Mediccine
    • 国際学会 / 招待講演

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公開日: 2018-12-17  

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