骨髄増殖性腫瘍における重複遺伝子異常の意義及び急性転化メカニズムの解明

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K19554
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 亀田 拓郎 宮崎大学, 医学部, 医員 (30468029)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 骨髄増殖性腫瘍 / 急性転化

研究実績の概要

骨髄増殖性腫瘍は、時に急性白血病へ転化し、その場合の予後は不良である。遺伝子変異の多段階蓄積により急性転化が生じると想定されるが、詳細な分子機構は未解明である。本研究では、慢性期に高頻度にみられるシグナル伝達異常であるJAK2 変異（JAK2V617F）、エピゲノム異常であるTET2欠損のマウスモデルに、転写因子RUNX1の機能異常を引き起こすCBFb-MYH11融合遺伝子を導入し、2 重～3 重変異のモデルを作成し、急性転化が生じるかを検討した。
2 重～3 重変異モデルの作成に際しては、JAK2変異およびTET2欠損の遺伝子改変マウス同士の交配、骨髄細胞に対するレトロウイルスベクターを用いた融合遺伝子の導入、および骨髄移植などの実験手法を用いた。昨年度までに作成した「JAK2 変異+ 転写因子異常」、および「JAK2変異 + エピゲノム異常」による2 重変異モデルにおいては、12ヶ月の長期観察で急性転化は認められなかった。
本年度は「エピゲノム異常+ 転写因子異常」による2 重変異モデル、および「JAK2変異 + エピゲノム異常 + 転写因子異常」による 3重変異モデルを作成し、解析を行った。骨髄細胞に対するレトロウイルスベクターを用いたCBFb-MYH11融合遺伝子の導入は約20%の効率で可能であり、遺伝子導入後の全骨髄細胞をレシピエントマウスに移植し、上記モデルマウスを作成した。作成したモデルマウスにおいて、現在までの約2ヶ月の観察期間内では急性転化は認められなかった。また本研究から派生して、シグナル伝達異常と慢性血小板増多を呈するCALR変異マウス、およびCALR変異とTET2欠損の2重変異マウスを作成し、急性転化の有無について検討を開始した。これらの作成済みのモデルにおいて急性転化が生じるかについては、引き続き観察が必要である。

研究成果

• [雑誌論文] 遺伝子解析に基づくがん治療 骨髄増殖性腫瘍(MPN/CML) (2016)
  • 著者名/発表者名: 久冨木庸子、下田和哉
  • 雑誌名: がん分子標的治療Vol.14 No.1 巻: 14 ページ: 49-53
  • 査読あり
• [雑誌論文] Calreticulin mutant mice develop essential thrombocythemia that is ameliorated by the JAK inhibitor ruxolitinib (2016)
  • 著者名/発表者名: Shide K, Kameda T, Yamaji T, Sekine M, Inada N, Kamiunten A, Akizuki K, Nakamura K, Hidaka T, Kubuki Y, Shimoda H, Kitanaka A, Honda A, Sawaguchi A, Abe H, Miike T, Iwakiri H, Tahara Y, Sueta M, Hasuike S, Yamamoto S, Nagata K, Shimoda K
  • 雑誌名: Leukemia. 巻: 308 ページ: 1-21
  • DOI: 10.1038/leu.2016.308
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 骨髄増殖性腫瘍のWHO分類 (2016)
  • 著者名/発表者名: 久冨木庸子、下田和哉
  • 雑誌名: 日本臨牀増刊号 巻: 74 ページ: 381-385
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differences in Hematological and Clinical Features Between Essential Thrombocythemia Cases With JAK2- or CALR-Mutations. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kubuki Y, Yamaji T, Hidaka T, Kameda T, Shide K, Sekine M, Kamiunten A, Akizuki K, Shimoda H, Tahira Y, Nakamura K, Abe H, Miike T, Iwakiri H, Tahara Y, Sueta M, Yamamoto S, Hasuike S, Nagata K, Kitanaka A, Shimoda K
  • 雑誌名: Annals of laboratory medicine. 巻: 37 ページ: 159-161
  • DOI: 10.3343/alm.2017.37.2.159.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] TET2 mutation in diffuse large B-cell lymphoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kubuki Y, Yamaji T, Hidaka T, Kameda T, Shide K, Sekine M, Kamiunten A, Akizuki K, Shimoda H, Tahira Y, Nakamura K, Abe H, Miike T, Iwakiri H, Tahara Y, Sueta M, Yamamoto S, Hasuike S, Nagata K, Kitanaka A, Shimoda K
  • 雑誌名: Journal of clinical and experimental hematopathology 巻: 56 ページ: 145-149
  • DOI: 10.3960/jslrt.56.145
  • 査読あり
• [学会発表] Mogamulizumab for adult T-cell leukemia/lymphoma in clinical practice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Masaaki Sekine, Yoko Kubuki, Takuro Kameda, Masaki Takeuchi, Takanori Toyama, Noriaki Kawano, Kouichi Maeda, Siichi Sato, Junzo Ishizaki, Hiroshi Kawano, Ayako Kamiunten, Keiichi Akizuki, Yuki Tahira, Haruko Shimoda, Kotaro Shide, Tomonori Hidaka, Akira Kitanaka, Kiyoshi Yamashita, Hitoshi Matsuoka, Kazuya Shimoda
  • 学会等名: 58th ASH Annual Meeting & Exposition
  • 発表場所: サンディエゴ（アメリカ合衆国）
  • 年月日: 2016-12-03 – 2016-12-06
  • 国際学会
• [学会発表] Physiological Expression of Calr Mutant Increases Cell Growth and Cytokine Independency in Human Cell Lines Expressing Mpl, and Develops Essential Thrombocythemia in Mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kotaro Shide, Takuro Kameda, Masaaki Sekine, Ayako Kamiunten, Keiichi Akizuki, Yuki Tahira, Tomonori Hidaka, Yoko Kubuki, Arata Honda, Akira Sawaguchi, Akira Kitanaka, Kazuya Shimoda
  • 学会等名: 58th ASH Annual Meeting & Exposition
  • 発表場所: サンディエゴ（アメリカ合衆国）
  • 年月日: 2016-12-03 – 2016-12-06
  • 国際学会
• [学会発表] CALRdel52 mutation activates the JAK-STAT pathway in coordination with MPL, and causes ET in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kotaro Shide, Takuro Kameda, Masaaki Sekine, Ayako Kamiunten, Keiichi Akizuki, Yuki Tahira, Haruko Shimoda, Tomonori Hidaka, Yoko Kubuki, Arata Honda, Akira Kitanaka, Kazuya Shimoda
  • 学会等名: 第78回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: パシフィコ横浜（横浜市）
  • 年月日: 2016-10-15
• [学会発表] ＴＥＴ2欠損はHBZトランスジェニックマウスの病態を増悪させる (2016)
  • 著者名/発表者名: 亀田拓郎、幣光太郎、関根雅明、山路卓巳、田平優貴、秋月渓一、上運天綾子、下田晴子、日髙智徳、久冨木庸子、北中明、下田和哉
  • 学会等名: 第3回日本HTLV-1学会学術集会
  • 発表場所: 鹿児島県市町村自治会館（鹿児島市）
  • 年月日: 2016-08-27
• [図書] 診断と治療のABC113 慢性骨髄背白血病 骨髄増殖性腫瘍 (2016)
  • 著者名/発表者名: 亀田拓郎、下田和哉
  • 総ページ数: 223
  • 出版者: 株式会社最新医学社
• [図書] 白血病学（下）－最新の基礎，臨床研究－ (2016)
  • 著者名/発表者名: 亀田拓郎、下田和哉
  • 総ページ数: 582
  • 出版者: 日本臨牀社