2015 年度実施状況報告書

潰瘍性大腸炎術後の回腸嚢炎における内因性抗菌タンパクの病態関与と治療応用の研究

研究課題

研究課題/領域番号	15K19868
研究機関	東北大学
研究代表者	渡辺和宏東北大学, 大学病院, 助教 (30569588)
研究期間 (年度)	2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード	潰瘍性大腸炎 / RELMβ
研究実績の概要	今年度は、Resistin like molecule beta/Found in inflammatory zone 2 (RELMβ/FIZZ2)のin vitroでの抗菌活性の詳細の検討を行った。購入したRELMβ/FIZZ2のリコンビナントタンパクを用いて、Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus faecalisの３菌株を対象として、寒天培地法（agar spot test）および液体培地法（liquid broth test）を用いて抗菌活性の検討を行った。従来のわれわれの検討では、S.aureusに濃度依存性に抗菌活性を認めていたが、今回の検討ではいずれの菌株に対しても明らかな抗菌活性を認めなくなっていた。RELMβ/FIZZ2はジスルフィド結合によって３量体が２つ結合し６量体を形成する非常に特殊な構造をしており（Pastel et al, Science. 2004）、条件によって抗菌活性が大きく変化することが理由と考えられた。実際、従来の検討において、液体培地法では寒天培地法の1/100の低濃度でRELMβ/FIZZ2の抗菌活性を認めており、抗菌活性を示す至適条件を検討することが必要と考えた。現在、培地を低pHにすることで６量体を単量体にするなどの条件設定を行い、抗菌活性の至適条件を再検討している。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 3: やや遅れている理由 RELMβ/FIZZ2が抗菌活性を示す至適条件を得ることに難渋しており、当初の計画よりやや遅れている。
今後の研究の推進方策	in vitroでのは、引き続きRELMβ/FIZZ2の抗菌活性の至適条件を得ることを中心におこなっていく。並行して、臨床検体を用いた検討（潰瘍性大腸炎・家族性大腸腺腫症に対する大腸全摘術後の回腸嚢粘膜・便中の内在性抗菌ペプチド、抗菌タンパクの経時的変化の検討）の準備を行っていく。