研究課題/領域番号 |
15K20064
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研究機関 | 久留米大学 |
研究代表者 |
大下 健輔 久留米大学, 医学部, 助教 (70529510)
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研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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キーワード | HCN / 後根神経節 / 脊髄後角 / 遺伝子治療 / 炎症性疼痛 |
研究実績の概要 |
後根神経節に発現するHCN2が疼痛治療のターゲットになるか明らかにするため、現在後根神経節の初代培養、電気生理学的機能解析を継続している。また、HCN2の優性抑制性変異体のウイルスベクターの作動確認を今後行う予定である。 一方で、同じHCNチャネルファミリーであるHCN4の脊髄後角における局在をさらに詳細に調べるため、HCN4遺伝子の翻訳開始点にテトラサイクリントランスアクチベータ (tTA) とその応答配列(TRE) をノックインしたマウス作成した。このマウスとテトラサイクリン応答配列制御下でGFP を発現するトランスジェニックマウスとを交配したマウスを利用して蛍光免疫染色を行った。このマウスはHCN4とGFPが共発現するが、頸髄、胸髄、腰髄いずれにおいても脊髄後角第2層に発現していることが見いだされた。脊髄の急性スライスでのGFP陽性ニューロンの同定は困難であり、電気生理学的な解析までは至っていない。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ウイルス粒子作成段階まで研究が進行している。HCN4発現部位をニューロンレベルで同定することができている。
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今後の研究の推進方策 |
HCN2の優性抑制性変異体の作動確認を行う予定である。 当初の計画では後根神経節をターゲットとして研究を実施する予定であったが、脊髄後角に特異的にHCNチャネルが発現することが見いだされており、脊髄後角もターゲットとしてさらなる機能解析を行い、遺伝子治療のターゲットとなりうるか検討していく。
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次年度使用額が生じた理由 |
当初のターゲットと異なる脊髄後角を用いた実験を多く行い、脊髄の急性スライスを用いた実験技術の習得に時間を要したため。
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次年度使用額の使用計画 |
引き続き、後根神経節の培養やウイルス導入に必要な諸経費に充当する。
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