膀胱癌の病態生理におけるEpacの役割

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K20095
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 逸見 百江 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 助教 (40585890)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 膀胱がん

研究実績の概要

我々は、ｍRNAレベル、タンパク質レベルでのEpac1、Epac2発現を定量PCR法をウエスタンブロッティング法を用いて、ヒト正常膀胱組織とヒト膀胱癌組織で比較したところ癌組織においてEpac-1、Epac-2両者の発現が低下していることを明らかにした。さらに、同一患者由来の正常部位と癌部での発現比較においても同様の結果を得た。これらのことからEpac-1,Epac-2の癌での役割を明らかにすることを目的に次の実験を行った。初めに、同様の結果が細胞株でも得られるのかどうかを確認するために膀胱上皮癌由来細胞株kk47 細胞、UMUC3 細胞でのEpac-1,Epac-2の発現を正常膀胱上皮細胞と比較して確認したところ、組織の結果と同様にEpac-1、Epac-2の発現低下を認めた。
そこで、Epac-1発現ベクターを用いて、kk47 細胞、UMUC3 細胞に安定的にEpac-1を発現させ癌細胞に及ぼす影響をみたところ、Epac-1を強制的に発現させた細胞株において細胞同士の接着が高まっていることを見出した。そこで、細胞の生存に影響を及ぼす可能性が考えられたのでalamar blue法を用いて細胞の生存を確認したところ、Epac-1強制発現による細胞生存への影響は見られなかった。そこで、接着性の増加に伴って、癌細胞の遊走能が低下している可能性が考えられたため、創傷治癒解析を行った。その結果、Epac-1を過剰に発現した細胞株でその遊走性の顕著な低下を認めた。さらに、高発現させたEpac-1の局在の解析を行ったところ、細胞同士が接着している細胞膜付近で高い集積を示していた。これらのことから、癌細胞においてEpac-1発現を誘導することは細胞の遊走性を抑制することに重要であることが示唆され、これらをまとめてBiochemical and Biophysical Research Communicationsジャーナルに投稿し受理された。

研究成果

• [雑誌論文] Overexpression of exchange protein directly activated by cAMP-1 (EPAC1) attenuates bladder cancer cell migration (2018)
  • 著者名/発表者名: Ichikawa Hirona、Itsumi Momoe、Kajioka Shunichi、Maki Tomoko、Lee Ken、Tomita Makoto、Yamaoka Shoji
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 495 ページ: 64～70
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2017.10.142
• [雑誌論文] A20 restores phorbol ester-induced differentiation of THP-1 cells in the absence of nuclear factor-κB activation (2017)
  • 著者名/発表者名: Osako Miho、Itsumi Momoe、Yamaguchi Haruka、Takeuchi Hiroaki、Yamaoka Shoji
  • 雑誌名: Journal of Cellular Biochemistry 巻: 119 ページ: 1475～1487
  • DOI: 10.1002/jcb.26308
• [雑誌論文] Glutathione Primes T Cell Metabolism for Inflammation (2017)
  • 著者名/発表者名: Mak TW, Grusdat M, Duncan GS, Dostert C, Nonnenmacher Y, Cox M, Binsfeld C, Hao Z, Brustle A, Itsumi M, Jager C, Chen Y, Pinkenburg O, Camara B, Ollert M, Bindslev-Jensen C, Vasiliou V, Gorrini C, Lang PA, Lohoff M, Harris IS, Hiller K, Brenner D.
  • 雑誌名: Immunity 巻: 46 ページ: 675～689
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2017.03.019
• [学会発表] EPAC1 suppresses migration of bladder cancer cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hirona Ichikawa, Shoji Yamaoka, Shunichi Kajioka, Momoe Itsumi
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] LUBAC構成分子HOIL-1Lの発現低下によるHTLV-I感染細胞の増殖抑制メカニズム (2017)
  • 著者名/発表者名: 逸見百江、山岡昇司
  • 学会等名: 第4回日本HTLV-1学会学術集会