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2015 年度 実施状況報告書

内耳におけるリン脂質代謝酵素と小胞体ストレス応答の解明

研究課題

研究課題/領域番号 15K20178
研究機関山形大学

研究代表者

松井 祐興  山形大学, 医学部, 非常勤講師 (60594322)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード内耳 / DGK
研究実績の概要

1、DGKアイソザイムの蝸牛における発現(免疫組織染色)
免疫組織染色を用いて、正常モルモット蝸牛におけるDGKアイソザイムの発現の有無を確認した。始めにモルモットでも抗体のpositive controlがとれているDGKβ、DGKι、DGKζ、またPIシグナリングの関連するGαq/11の免疫染色をおこなったところ、DGKιはらせん神経節細胞の細胞質、DGKζは内有毛細胞、支持細胞、らせん神経節細胞の核に発現していた。また、Gαq/11は内外有毛細胞、らせん神経節細胞の細胞膜に発現していることを確認した。
2、内耳障害モルモットの確立
聴力正常モルモットに4-8kHz、125dBのoctave band noiseを3時間暴露することにより、中等度~高度の難聴を示すモデルを確立した。このモデルでは4-8kHz領域で約70%程度の外有毛細胞の脱落が見られる。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

モルモットによる動物実験のため、実験誤差が認められ、複数回の実験を要するため時間を要した。

今後の研究の推進方策

1、DGKアイソザイムの蝸牛における発現(RT-PCR)
DGKアイソザイムの発現の有無をmRNAレベルでも検討し、確認する予定である。
またDGKεに関しても検討する。
2、内耳障害後のDGKアイソザイムの発現の変化(免疫組織染色/RT-PCR)
内耳障害を与えたあと、DGKアイソザイムの発現がどのように変化するかを検討する。

次年度使用額が生じた理由

計画はすすんだが若干の次年度使用額が生じた

次年度使用額の使用計画

蝸牛におけるDGK発現や小胞体ストレス関連の抗体購入とする予定である

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公開日: 2017-01-06  

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