研究実績の概要 |
骨細胞が放出する細胞外微粒子のひとつであるExosomeに特異的に含まれるmicro RNAを同定する目的で実験を行った。野生型マウスと骨細胞除去マウスの血清からexosomal RNAを抽出した。マウス骨細胞株MLO-Y4細胞とマウス骨髄ストローマ細胞株ST-2細胞からRNAを抽出し、ならびに培養上清中からexosomal RNAを抽出した。これらのRNAサンプルを用いてmicro RNAアレイ解析ならびに次世代シークエンス解析を行った。アレイ解析の結果、骨細胞除去マウスの血清中で増加もしくは減少しているexosomal miRNAを30種類ずつ同定し、マウス骨細胞株であるMLO-Y4が放出するexosomeに含まれるmicro RNAを125種類同定した。さらに次世代シークエンス解析によるmicro RNA発現量解析とあわせた結果、miR-3473a, miR-3473b, miR-3473e, miR-5128, miR-6244, miR-6239, miR-705, miR-208a-5p, miR-3104-5p, miR-1224-5p, miR-5621-5pが野生型マウスにくらべて骨細胞除去マウスの血清中で減少しており、かつ骨髄ストローマ細胞株ST-2細胞にくらべて骨細胞株MLO-Y4細胞のexosomeに多く含まれるmicro RNAであることが分かった。これら11種類のmicro RNAは骨細胞由来Exosomeに特異的に含有されるmicro RNAであると考えられた。 これらの結果はBiomedical Reports誌に論文として掲載された。(Circulating osteocyte-derived exosomes contain miRNAs which are enriched in exosomes from MLO-Y4 cells. Biomed Rep. 2017 Feb, Volume 6 Issue 2, 2049-9434)
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