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本研究はhiPS細胞に蛍光ラベルしβ細胞への分化をモニタリングできるシステムを用いてhiPS細胞からβ細胞への分化のメカニズムの 解明を目指すものである。hiPS細胞からβ細胞への分化過程においてNGN3を発現する膵内分泌前駆細胞が出現するとmCherry が光る細胞となり、Insulinを発現するVenus が光る細胞を確認することができる。
本研究の最大の特徴はhiPS細胞からβ細胞への分化後に機能的解析を行った上でのシングルセル解析であり機能との結び付けが可能でると思われる。そうした細胞のシングルセル解析を行ったところ、意外にもGlucagon-insulin ダブルポジティブのポリホルモンの細胞が大量に存在していたというのが今回の解析で見られた。生体とまったく同じ能力ではないが成熟へと向かわせる能力は有するのではないかと考える。実際に生体にもポリホルモンは存在している。これまでのヒト膵臓由来細胞のシングルセル解析の報告はいくつかあるがあえてGlucagon-Insulin ポジティブな細胞を除いた状態での解析が行われているために実際にはその細胞の存在を解析はされていない。総合的な解析でVenus陽性とダブル陽性細胞の間では違いは見出されなかった。このことは個々に見ると遺伝子の発現はバラバラであり多様化していることがわかる。また、これまで言われていた例えばNkx6.1やMafAの発現などは全体的に低い発現である。しかし、詳細にGlucagonの発現強度などをもとに分類することが可能であり、その上での解析を行うといくつかの遺伝子がピックアップされた。t-SNE解析によりα細胞様のクラスターとβ細胞様のクラスターで７群に分けることができた。それらの中にはPDX1の他に多くの未知遺伝子も検出された。今後それらの遺伝子の関連性を検証する必要がある。
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