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2004 年度 実績報告書

無細胞蛋白合成法を用いた新規マラリア伝搬阻止ワクチンの作成

研究課題

研究課題/領域番号 16017273
研究機関愛媛大学

研究代表者

坪井 敬文  愛媛大学, 無細胞生命科学工学研究センター, 教授 (00188616)

研究分担者 竹尾 暁  愛媛大学, 無細胞生命科学工学研究センター, 講師 (40302666)
キーワードマラリア / 伝搬阻止 / ワクチン / 無細胞タンパク質合成 / 国際研究者交流 / タイ
研究概要

マラリア伝搬阻止ワクチンは、それ単独でマラリアの流行を抑制できるのみならず、現在開発中の他種のマラリアワクチン及び治療薬に対する新たな耐性原虫の拡散を阻止できる点で、カクテルマラリアワクチンの必須の構成成分と考えられている。ところが、熱帯熱マラリア伝搬阻止ワクチン候補として研究が進められている抗原は現在までわずかに4種類であり、未だ実用化に至ったワクチンは無い。熱帯熱マラリア原虫のゲノム情報が2002年に公開され、媒介蚊ステージで発育する生殖母体に特異的に発現するタンパク質の中に有望な伝搬阻止ワクチン候補が含まれていると予想されている。しかし、既存の方法で熱帯熱マラリア原虫蛋白の発現は困難であった。本研究は、コムギ胚芽無細胞タンパク質合成系を用いて生殖母体期のタンパク質から新規の伝搬阻止ワクチン抗原を同定することを目的に開始した。
1.既知の熱帯熱マラリア伝搬阻止ワクチン候補抗原であるPfs25をモデルとして、原虫由来遺伝子(AT含量が70%以上)、及び酵母発現用にコドンを改変した人工合成遺伝子(AT含量が約50%)をコムギ胚芽無細胞タンパク質合成系を用いて発現した。その結果、いずれも等量に発現でき、マウスに対する高い抗原性も同等であった。さらに、その抗血清のワクチン効果も同等に確認された。
2.熱帯熱マラリア原虫のゲノム情報から、生殖母体に特異的に発現していることが予想されている遺伝子を約200種類選択した。これらの遺伝子それぞれの全長を増幅するPCRプライマーを設計した。熱帯熱マラリア原虫NF54培養株の生殖母体から総RNAを抽出しcDNAを作成した後、これらを用いて生殖母体特異的cDNAをPCR増幅し約190種類のcDNAをクローン化した。コムギ胚芽無細胞タンパク質合成系を用いて組換えタンパク質の発現を試みたところ、現在までに約100種類の組換えタンパク質合成に成功した。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2004

すべて 雑誌論文 (6件)

  • [雑誌論文] Plasmodium vivax transmission : chances for control?2004

    • 著者名/発表者名
      Sattabongkot J
    • 雑誌名

      Trends in Parasitology 20

      ページ: 192-198

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] The Plasmodium falciparum clag9 gene encodes a rhoptry protein that is transferred to the host erythrocyte upon invasion.2004

    • 著者名/発表者名
      Ling IT
    • 雑誌名

      Molecular Microbiology 52

      ページ: 107-118

  • [雑誌論文] A rapid genotyping method for the vivax malaria transmission-blocking vaccine candidates, Pvs25 and Pvs28.2004

    • 著者名/発表者名
      Tsuboi T
    • 雑誌名

      Parasitology International 53

      ページ: 211-216

  • [雑誌論文] Plasmodium ookinete-secreted proteins secreted through a common micronemal pathway are targets of blocking malaria transmission.2004

    • 著者名/発表者名
      Li F
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry 279

      ページ: 26635-26644

  • [雑誌論文] Potent immunogenicity of DNA vaccines encoding Plasmodium vivax transmission-blocking vaccine candidates Pvs25 and Pvs28 - evaluation of homologous and heterologous antigen-delivery prime-boost strategy.2004

    • 著者名/発表者名
      Kongkasuriyachai D
    • 雑誌名

      Vaccine 22

      ページ: 3205-3213

  • [雑誌論文] Molecular analysis of Plasmodium ovale variants.2004

    • 著者名/発表者名
      Win TT
    • 雑誌名

      Emerging Infectious Diseases 10

      ページ: 1235-1240

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公開日: 2006-07-12   更新日: 2016-04-21  

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