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2004 年度 実績報告書

ゲノム機能の次世代への継承に必要なクロマチンドメイン構造とその確立

研究課題

研究課題/領域番号 16045206
研究機関三重大学

研究代表者

奥村 克純  三重大学, 生物資源学部, 教授 (30177183)

キーワードヘテロクロマチン / エピジェネティック / セントロメア / 複製タイミング / 複製フォーク / DNAファイバー / ES細胞 / アセチル化
研究概要

発生段階でクロマチンドメイン・複製ドメインがいかに確立するかを調べる手法として、ES細胞に修飾ヌクレオチドを取り込ませ複製解析するシステムを確立し、複製起点間の距離等を解析中である。また、受精卵を体外培養する系で複製解析手法を確立中である。
マウスセントロメア領域、マイナーサテライトDNA(MS)およびメジャーサテライトDNA(MMS)のクロマチン構造のエピジェネティックな制御について複製との関係で解析した。マウスm5S胚性線維芽細胞株を5アザデオキシシチジン(azadC)処理した際のMS,MMS領域のヘテロクロマチン構造、修飾、複製タイミング、複製フォーク進行速度等について解析した。azadC処理によりMMS領域はヘテロクロマチン構造の崩壊が認められ、崩壊した領域が高アセチル化すること、ヘテロクロマチン結合タンパク質HP1□の結合が極めて少なくなることを見出した。MS領域は、セントロメア結合タンパク質CENPBの結合も変化なく、ヘテロクロマチン状態を維持していると推定した。次に核内複製フォーカスパターン(S期をI〜IVに分類)からそれぞれの複製タイミングを判定した。MMS領域はパターンII、MS領域はIIIの時期に複製するがazadC処理でヘテロクロマチン構造が崩壊した部分はパターンIに、MS領域はIIに複製する核の割合が増え、MS,MMS領域ともに複製タイミングが早まっていた。MS領域は、隣り合うMMS領域の複製タイミングの早まりに引きずられ早くなったものと推定した。さらに、複製フォークの進行速度を複製フォークの進行とMS,MMS領域をDNAファイバー上に同時検出するシステムを確立し、調べた結果、MMS領域のみ速くなっていた。これらの結果により、クロマチンのエピジェネティックな構造変換が複製タイミング、複製フォークの進行速度に大きく影響することを明らかにした。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2005 2004

すべて 雑誌論文 (6件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Regulation of Replication Fork Progression at the R/G Chromosomal Band Boundary and Pericentromeric Heterochromatin in Mammalian Cells2005

    • 著者名/発表者名
      Shin-ichiro Takebayashi
    • 雑誌名

      Experimental. Cell Research 304巻1号

      ページ: 162-174

  • [雑誌論文] Zinc transporters, ZnT5 and ZnT7, are required for the activation of alkaline phosphatases, zinc-requiring enzymes that are GPI-anchored to cytoplasmic membrane2005

    • 著者名/発表者名
      Tomoyuki Suzuki
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry 280巻1号

      ページ: 637-643

  • [雑誌論文] Structure and evolution of the mouse pregnancy-specific glycoprotein (Psg) gene locus2005

    • 著者名/発表者名
      Andrew S McLellan
    • 雑誌名

      BMC Genomics 6巻4号(印刷中)

  • [雑誌論文] 核内クロマチン構造と複製・転写のダイナミクス2005

    • 著者名/発表者名
      奥村克純
    • 雑誌名

      生化学 77巻3号

      ページ: 191-199

  • [雑誌論文] A Novel Isoform of Vinexin, Vinexin γ, Regulates Sox9 Gene Expression through Activation of MAPK Cascade in Mouse Fetal Gonad2005

    • 著者名/発表者名
      Makoto Matsuyama
    • 雑誌名

      Genes to Cells 10巻(印刷中)

  • [雑誌論文] A 210-kb segment of tandem repeats and retroelements located between imprinted subdomains of mouse distal chromosome 72004

    • 著者名/発表者名
      Hisao Shirohzu
    • 雑誌名

      DNA Research 11巻5号

      ページ: 325-334

  • [図書] クロマチン・染色体実験プロトコール2004

    • 著者名/発表者名
      押村光雄ら編
    • 総ページ数
      231
    • 出版者
      羊土社

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公開日: 2006-07-12   更新日: 2016-04-21  

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