ミオシンナノシステムによる細胞内情報制御

2007 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16083205
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 須藤 和夫 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 教授 (20111453)
• 研究分担者: 昆 隆英 東京大学, 大学院・総合文化研究科, 助教 (30332620)
• キーワード: モータータンパク質 / ダイニン / 微小管 / レバーアーム仮説 / 1分子計測 / REFT / 全反射顕微鏡

研究概要

モーターシステムの動態を明らかにするため、われわれは微小管上を滑り運動する細胞質ダイニン組換え体を用い、そのATP加水分解に伴う構造変化と、構造変化に共役した滑り運動機構の研究を続けてきた.昨年度は、負染色電子顕微鏡法を用いた、ダイニンモータードメイン(MD)の構造解析を終了した.ここでは、レバーアームに相当するリンカーがAAAリングに沿って16nmものスイングをすることが明らかになった.また、ダイニンモータードメインを構成するサブドメインのマッピングも完了した.次に、ダイニンの微小管上での滑り運動を1分子力学計測あるいは1分子FRET/TIRF解析するためのツールの構築に成功した。まず、MDヘテロダイマー形成のためのタグの開発をおこなった.さらにMD上の反応性の高いCys残基をすべて除いたCys-Lightダイニン構築にも成功した.こうしたツールは今後の1分子計測の基礎技術となる.これを用いて、1分子のMDダイマーが微小管上を歩行する様を可視化する.

研究成果

• [雑誌論文] HOMER2 binds MYO18B and enhances its activity to suppress anchorage in dependent growth (2007)
  • 著者名/発表者名: Ajima R, Kajiya K, Inoue T, Tani M, Shiraishi-Yamaguchi Y, Maeda M, Segawa T, Furuichi T, Sutoh K, Yokota J
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 356 ページ: 851-856
  • 査読あり
• [雑誌論文] The coordination of cyclic microtubule association/dissociation and tail swing of cytoplasmic dvnein (2007)
  • 著者名/発表者名: Kenji Imamula, Takahide Kon, Reiko Ohkura, and Kazuo Sutoh
  • 雑誌名: PNAS 104 ページ: 16134-16139
  • 査読あり
• [雑誌論文] Kinetic characterization of tail swing steps in the ATPase cycle of Dictyostelium cytoplasmic dynein (2007)
  • 著者名/発表者名: Toshifumi Mogami, Takahide Kon, Kohji Ito, Kazuo Sutoh
  • 雑誌名: J. Bio. Chem 282 ページ: 21639-21644
  • 査読あり
• [備考]
  • URL: http://bio.c.u-tokyo.ac.jp/labs/sutoh/