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2005 年度 実績報告書

卵子の細胞分化・死減調節系の解明による次世代型動物発生工学技術の基盤形成

研究課題

研究課題/領域番号 16108003
研究機関東北大学

研究代表者

佐藤 英明  東北大学, 大学院・農学研究科, 教授 (80093243)

研究分担者 西森 克彦  東北大学, 大学院・農学研究科, 教授 (10164609)
竹家 達夫  奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (60112330)
眞鍋 昇  東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80243070)
佐々田 比呂志  東北大学, 大学院・農学研究科, 助教授 (90158931)
松本 浩道  東北大学, 大学院・農学研究科, 助手 (70241552)
キーワード卵胞発育 / 卵胞閉鎖 / VEGF / CD44 / CD44 antigen glycosylation / ミニブタ体細胞クローン / 未成熟卵子凍結保存法(SWEID) / Connexin 43
研究概要

1)ラット卵胞発育と卵胞膜におけるVEGF120及び164F, angiopoietin及びそれらのレセプターの発現を解析し、hCG投与により、発現が上昇することを確認した。また、自然発情を示すラット卵巣にVEGF120及び164を直接注入することにより卵胞血管網の増殖が誘起され、血中エストリジェン濃度が上昇した。また、排卵数も有意に上昇し、排卵卵子はすべて受精し、新生子に発育した。
2)ブタ卵胞閉鎖に関わるCD44,CD44 antigen glycosylationの役割を解析し、これらの分子がマクロファージによる顆粒膜細胞の貪食に関係することを明らかにした。
3)初期卵胞の分化に基底膜形成が関わること、また基底膜形成にヒアルロン酸が関わることを明らかにした。
4)ブタ及びラット卵巣におけるConnexin43の発現とその生理機能を明らかにした。
5)LGR4/Gpr48遺伝子が2次、3次卵胞で発現することを示したが、LGR4/Gpr48遺伝子欠損マウスは致死であった。
6)死滅を免れた卵巣卵が体細胞クローンなどの除核未受精卵の体外受精に使えるか否かを検討した。死滅を免れた体外成熟卵子を用いてミニブタ体細胞クローンの誕生に成功した。
7)Maturation promoting factorの発現レベルの高いブタ成熟卵子を用いた再構築胚は早期染色体凝縮を誘起することを明らかにした。
8)MetaphaseIIで分裂を人為的に停止させる方法により、受精・発生能力の高い成熟卵子を得ることに成功した。
9)卵巣の未成熟卵子の凍結保存に取り組み、ブタ未成熟卵子を遠心し、偏在した脂質を細胞質から除去し、ガラス化凍結保存し、成熟卵子を得た。段階的に耐凍剤に曝露する新し凍結保存法(SWEIDと命名)を考案し、凍結保存マウス未成熟卵子由来の新生子を得ることに成功した。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2006 2005 その他

すべて 雑誌論文 (6件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Expression and glycosylation with polylactosamine of CD44 antigen on macrophages during follicular atresia in pig ovaries.2006

    • 著者名/発表者名
      佐藤英明
    • 雑誌名

      Biol.Reprod. (in press)

  • [雑誌論文] PKA is implocated in the phosphorylation of Cx43 induced by stimulation with FSH in rat granulosa cells2006

    • 著者名/発表者名
      竹塚達夫
    • 雑誌名

      J.Reprod.Dev (in press)

  • [雑誌論文] Changes of mRNA expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), angiopoietins and their specific receptors during the periovulatory phase in eCG/hCG-primed immature female rats.2005

    • 著者名/発表者名
      佐藤英明
    • 雑誌名

      J.Exp.Zool 303A

      ページ: 590-597

  • [雑誌論文] Production of live offsprings from mouse germinal vesicle-stage oocytes vitrified by a modified step-wise method, SWEID.2005

    • 著者名/発表者名
      佐藤英明
    • 雑誌名

      Fertil.Steril 84(suupl.2)

      ページ: 1078-1082

  • [雑誌論文] Changes in Expression and Localization of Connexin 43 mRNA and Protein in Porcine Ovary Granulosa Cells during Follicular Atresia.2005

    • 著者名/発表者名
      眞鍋昇
    • 雑誌名

      J.Reprod.Dev 51(5)

      ページ: 627-637

  • [雑誌論文] LGR4/Gpr48 is essential for renal development/function in mice

    • 著者名/発表者名
      西森克彦
    • 雑誌名

      J.Endcrinol submitted

  • [図書] 生殖補助医療(ART)胚培養の理論と実際(日本哺乳動物卵子学会編)2005

    • 著者名/発表者名
      佐藤英明
    • 総ページ数
      274
    • 出版者
      近代出版

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公開日: 2007-04-02   更新日: 2016-04-21  

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