新しい平滑筋収縮制御機構の解析・パートII

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16209007
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 小浜 一弘 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (30101116)
• 研究分担者: 石川 良樹 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (20212863) ; 中村 彰男 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (30282388) ; 吉山 伸司 群馬大学, 大学院医学系研究科, 助手 (30396650) ; 田中 秀幸 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 教務員 (70343085) ; 登坂 雅彦 群馬大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (40323357)
• キーワード: 薬理学 / 蛋白質 / 循環器・高血圧

研究概要

昨年度、血小板成長因子(PDGF)に対する血管平滑筋の遊走を調べると、非(脱)リン酸化のままでPDGFに対して遊走することがわかった。この遊走はミオシン特異的阻害薬ブレビスタチンで阻害された。本年度はミオシンを変性させずに精製して、このATPase活性に対する阻害作用を調べた。非リン酸化のミオシンの阻害作用は遊走の阻害を説明できる濃度であった。これまでの発表では、ミオシンに対するブレビスタチンの作用は大変弱いとされていたが、我々はこの問題を解決した。このミオシンは頭部の構造に著しい変化が見つけられた。本年度は、さらにこれまでに見つかったアラキドン酸(AA)のミオシンATPase促進効果について検討した。AAは非リン酸化ミオシンでのATPaseを増強するが、二重結合の内8,9が重要であることがわかった。Transient kineticsではミオシン頭部が重要で、ATPが分解されたのちPiの放出が促進されることを明らかにした。さらに生理的AA作用を検出するため、血管平滑筋細胞の収縮と遊走に対するAAの作用も調べ、いくつかの細胞内情報伝達系の阻害剤を与えると、GPCRの系列が関与することが明らかになった。小浜は研究代表者として全体の統一を図るほかに、細胞培養を行った。中村は各種蛋白質を発現させるが、石川は発現蛋白質を精製し、ミオシンのATPase活性を測定する。田中はミオシンをはじめとして関係する蛋白質の分子形態を調べた。

研究成果

• [雑誌論文] A calmodulin-dependent protein kinase from lower eukaryote Physarum polycephamum (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, A., Hanyuda, Y., Okagaki, T., Kohama, K.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 328 ページ: 838-844
• [雑誌論文] Claps-specific binding of Two aminoacyl-tRNA synthetases to annexin, a Ca^<2+> and phospholipid-binding protein. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shirakawa T., Nakamura, A., Kohama, K., Hirakata, M., Ogihara, S.
  • 雑誌名: Cell Structure and Function 29 ページ: 159-164
• [雑誌論文] Vanilloid receptor expressed in the sarcoplasmic reticulum of rat skeletal muscle. (2005)
  • 著者名/発表者名: Xin, H., Tanaka H., Yamaguchi, M., Takemori S., Takamura, A., Kohama, k.
  • 雑誌名: Biochem.Biophys.Res.Commun. 332 ページ: 756-762
• [雑誌論文] Structual evidence for non-canonical binding of Ca^<2+> to a canonical EF-hand of a conventional Myosin. (2005)
  • 著者名/発表者名: Debreczeni, J.E., Farkas, L., Harmat, V., Hetenyi, C., Hajdu, I., Zavodszky, P., Kohama, K., Nyitray, L.
  • 雑誌名: Journal of Biol.Chem. 50 ページ: 41458-41464
• [雑誌論文] Vascular endothelium has a local anti-adenovirus vector system and Glucocorticoid optimizes its gene transduction. (2005)
  • 著者名/発表者名: Murata, T., Hori, M., Lee, S., Nakamura, A., Kohama, K., Karaki, H., Ozaki, H.
  • 雑誌名: Arteroscler.Thromb.Vasc.Biol. 25 ページ: 1896-1803
• [産業財産権] 生体適合性ブロック共重合体、その用途及び製造方法 (2005)
  • 発明者名: 小濱 他
  • 権利者名: 小濱 他
  • 産業財産権番号: IP17-043
  • 出願年月日: 2005-10-04