研究課題
基盤研究(B)
近年、ウイルスに特異的なDNAの配列であるメチル化されていないCpGDNAを免疫系の細胞である抗原提示細胞に取り込ませて、細胞性免疫の活性する方法が注目を浴びている。しかし、CpG DNAそのものは生体で分解されやすく、デリバリーシステムの開発が不可欠である。そこで、SPGと核酸の複合体をこのデリバリーに応用することを目的として研究を始めた。すでに明らかにされている様に、シゾフィラン(SPG)は水素結合と疎水的相互作用によって、DNAと2:1の3重螺旋複合体を形成する。この複合体は培地中のDNaseによるDNAの加水分解を大幅に抑制するとともに、アルブミン等の血漿タンパクとDNAの非特異的吸着を抑制する。あらかじめs-SPGに修飾された細胞表面結合部位によって、s-SPG/DNA複合体はエンドサイトーシスにより細胞内に取り込まれる。たとえば、コレステロールを修飾したSPGとCpG DNAの細胞への取りこみでは、LDL受容体を介して細胞に取り込まれ、エンドソームへ移行する。後期エンドソームのベシクル内のpHは5程度まで低下することが知られている。pHが酸性側になると核酸塩基のプロトン化によって複合体が解離し、TLR9に認識されて免疫を刺激する。マウス由来のマクロファージにおけるIL12産生を比較したところ、細胞にCpG DNAを接触させた後24時間後のIL12の濃度をIL-12 ELISA Kit (ENDOGEN)にて定量した。NakedのCpG DNAを投与したときと比較して、4倍から5倍量のIL12が放出されていた。また、フルオロセインを修飾したSPGを細胞に接触させ、レーザー共焦点顕微鏡で観察したところ、R8とRGD修飾のSPGはマクロファージー内への取り込みが確認できた。
すべて 2004
すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 1件)
Biomaterials 25
ページ: 3109-3116
ページ: 3117
J.Am.Chem.Soc., 126, 8372-8373(204) 126
ページ: 8372
