| 研究課題/領域番号 |
16360476
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
原子力学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
飯田 敏行 大阪大学, 大学院工学研究科, 教授 (60115988)
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| 研究分担者 |
堀池 寛 大阪大学, 大学院工学研究科, 教授 (20252611)
清水 喜久雄 大阪大学, ラジオアイソトープ総合センター, 助教授 (20162696)
佐藤 文信 大阪大学, 大学院工学研究科, 助手 (40332746)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2006
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| キーワード | X線マイクロビーム / マイクロフォーカスX線 / 単一細胞照射 / 光ピンセット / 免疫蛍光抗体法 / DNA損傷 / 蛍光ガラス線量計 / 線量評価 |
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| 研究概要 |
近年、癌の粒子線・放射線治療の基礎研究として、細胞組織の特定領域や単一細胞にX線やイオンビームを照射し、その生物学的影響について調べられている。本研究では、テーブルトップサイズで、ビーム径10μmのX線マイクロビーム照射装置を開発した。国内外のマイクロビーム照射実験は、イオンビーム加速器や放射光施設等の大型装置を利用して行われてきたが、開発したテーブルトップサイズのX線マイクロビーム照射装置では、実験能率が高く、より複雑な実験条件を設定することが可能である。
X線マイクロビーム照射装置はマイクロフォーカスX線菅、X線導管、蛍光X線分析用X線検出器、サンプルステージ、光学顕微鏡、レーザー等から構成されている。光学顕微鏡で培養中の細胞試料を観測し、ターゲット細胞にX線マイクロビームを照射する。また、光学顕微鏡の対物レンズにレーザー光を導入し、光ピンセットによる培養中の細胞の位置操作やレーザー加工が可能となっている。
応用として、Normal human fibroblast(AG01522B)細胞を線量計測用の蛍光ガラス上で培養したサンプルを用いた。特定の単一のAG01522B細胞をX線マイクロビームで照射線量10Gyまで照射し、γ-H2AX(リン酸化型ヒストン)の免疫蛍光抗体法によるDNA二重鎖切断の測定を行った。
蛍光顕微鏡観察において、複数のダイクロイックミラーとフィルターを調整することで、X線照射による細胞のDNA損傷に関する発光と、蛍光ガラスからのX線照射に伴う発光中心による蛍光を分離することに成功し、一回の実験でDNA損傷と線量吸収のデータを得ることが出来た。
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