| 研究概要 |
目的:トランスジェニック・ゼブラフィッシュTg(fli1: EGFP)^<y1>を用いて,脳血管網形成過程の詳細を時間的空間的に明らかにするとともに,その分子機構について遺伝子発現解析と遺伝子発現操作により解明する.
方法:(1)バイオイメージング,(2)DNAチップによる血管網形成局所と血管構成細胞の網羅的遺伝子発現解析,(3)血管網形成の新しい培養系モデルの開発
結果:(1)二光子顕微鏡を用いたトランスジェニック・ゼブラフィッシュTg(fli1:EGFP)y1の生体イメージングにより,従来,その存在が疑われていたゼブラフィッシュのリンパ管の存在を明らかにするとともに,発生過程を捉えることに成功した(投稿中).さらに,リンパ管網形成(胸管系)と体壁の静脈網形成の由来となる脈管芽細胞「pioneer cell」の存在を明らかにした.「pioneer cell」は脳血管網と体幹血管網を連続する椎骨動脈の形成にも深く関わっており,その特性の解析は広く脈管網形成のメカニズムを探る上で重要である.一方,静脈とリンパ管発生過程のイメージングの際に,背側大動脈構成細胞より,分裂分離した遊離細胞がリンパ管と後主脈内に入り込み,分裂を繰り返す像を捉えることに成功した.脈管発生と血球発生・分化のクロストークの現場である可能性が示唆され,現在,それぞれの細胞の特性を解析中である.
一方,メダカの初期血管形成過程を明らかにし,モデル動物としての有用性を示した.
(2)ゼブラフィッシュ遺伝子発現解析用DNAチップを用いて,節間血管の形成異常を示す変異体FSSと野生型の3500遺伝子の発現比較解析を行った.現在,発現差の認められた遺伝子のデータマイニングを進めている.部位特異的に発現する遺伝子を受精後2日目までの胚のwhole mount in situ hybridizationによりスクリーニングを試みている.
(3)Fliの制御遺伝子の解析目的で血管内皮細胞の初代培養を試みている.
|
