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私達はdifferential display法により前立腺癌に極めて強く発現する新規遺伝子PCA-1をクローニングしたが、その生物学的機能はいまだ明らかでない。本研究では、前立腺癌細胞の増殖や細胞死にもたらすPCA-1の機能を解析し、その分子メカニズムを明らかにすることである。今年度は上記研究目的を達成するため、内在性PCA-1の発現が確認されたDU145を親株として、PCA-1を強発現させた前立腺癌細胞株ならびにsiRNA法を用いてknock downさせた細胞株をそれぞれ樹立した。PCA-1をknock down させた細胞株では、親株やコントロール細胞株に比較してElk-1のリン酸化が強く阻害されるとともに、そのtarget genesであるcyclinD1やBclxLの発現が有意に低下し、細胞増殖能の抑制や抗癌剤誘導性apoptosisの促進が確認された。一方、PCA-1を強発現させた細胞株では、mitogen activated protein kinaseの一つである、extracellular stress regulated kinase(ERK)のリン酸化と、Raf-1活性化に深く関わる遺伝子として近年注目されている、FLICE-like inhibitory protein(FLIP)の発現が上昇していた。以上の結果から、PCA-1が主にERK関連シグナルに作用することで前立腺癌のcell cycleやapoptosis 誘導を調節していると考えられた。このことはPCA-1が、ERKシグナルを下流に持つepidermal growth factorをはじめ各種成長因子の作用にも影響をもたらす可能性を示している。次年度はこれらの現象を説明できる分子メカニズムについて、特にERKの上流であるRaf-1/FLIPの相互作用やERKによるElk-1リン酸化に注目して解析をすすめる予定である。
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