サルを用いたC型肝炎モデルのsiRNAによる遺伝子治療

2005 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 16390204
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 横田 隆徳 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (90231688)
• 研究分担者: 明里 宏文 独立行政法人医薬基盤研究所, 霊長類医科学研究センター, 研究リーダー (20294671) ; 榎本 信幸 山梨大学, 医学工学総合研究部, 教授 (20251530)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• キーワード: RNA干渉 / siRNA / カチオニックベクター / C型肝炎 / タマリン / マーモセット / GBV-B / インテーフェロン

研究概要

1)新世界ザルによる急性C型肝炎のサロゲートモデルの確立:
HCVはヒトとチンパンジーにしか感染しないが、GBV-BはHCVに最も近縁なウイルスで、基本的な遺伝子構造もに酷似し、新世界ザル(タマリン・マーモセット)で急性肝炎を呈する。我々はGBV-B分子クローンからGBV-Bを作成して、本邦で初めてタマリンにおいて急性肝炎の感染実験モデルを確立したが、タマリンは安定した入手が困難であることから、今回マーモセットにおいてGBV-Bのin vivo増殖モデルを確立した。
2)マーモセットでのGBV-Bのin vivo増殖モデルでのsiRNAによるウイルス増殖抑制の成功:
1.3x10^8GEのGBV-Bの接種前後、3日間GBV-Bに対する化学合成siRNAをカチオニックベクターに包埋して下肢の静脈から投与したところ、投与10週後でも5.0mg/kgでは末梢血清のウイルスは検出感度という顕著な増殖抑制に成功した。一方、siRNAをカチオニックベクターを用いて静脈注射した場合はin vivoにおいてインターフェロンが誘導された。このsiRNA/カチオニックベクター複合体の投与により血中のインターフェロンが上昇したので、このウイルス抑制効果の1部はインターフェロン効果と考えられた。
3)インターフェロン誘導回避化学修飾の開発:
siRNAのセンス鎖、アンチセンス鎖に0メチル化、フッ化、S化などの化学修飾を組み合わせることによりICRマウスも用いたin vivoの実験でpreliminaryながらインターフェロン誘導を軽減する結果が得られている。

研究成果

• [雑誌論文] Transgenic siRNA increases the disease duration of ALS in a mouse model (2006)
  • 著者名/発表者名: Yokota T, Saito Y, Sasaguri H, Mitani T, Anzai M, Miyagishi M, Mizusawa H
  • 雑誌名: Arch Neurol (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNA干渉によるアルツハイマー病治療の可能性。 (2006)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: Progress in Medicine 55 ページ: 441-445
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiの核酸医薬としての可能性。 (2006)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 分子細胞治療 (印刷中)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Ubiquitination of APOBEC3 proteins by the Vif-Cullin5-ElonginB- ElonginC complex. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shirakawa K, Takaori-Kondo A, Kobayashi M, Tomonaga M, Izumi T, Fukunaga K, Sasada A., Abudu A., Miyauchi Y, Akari, Iwai K, Uchiyama T
  • 雑誌名: Virology 344 ページ: 263-266
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Transgenic siRNA halted amyotrophic lateral sclerosis in a mouse model. (2005)
  • 著者名/発表者名: Saito Y, Yokota T, Mitani T, Anzai M, Miyagishi M, Taira K, Mizusawa H
  • 雑誌名: J Biol Chem 280 ページ: 42826-42830
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Escape from the interferon response associated with RNA interference using vectors that encode long modified hairpin-RNA. (2005)
  • 著者名/発表者名: Akashi H, Miyagishi M, Yokota T, Watanabe T, Hino T, Nishina K, Kohara M, Taira K
  • 雑誌名: Molecular Bio Systems 1 ページ: 382-390
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Selective gene silencing of rat ATP-binding cassette G2 transporter in an in vitro blood-brain barrier model by short interfering RNA. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hori S, Ohtsuki S, Ichinowatari M, Yokota T, Ohtsuki M, Terasaki T
  • 雑誌名: J Neurochem 93 ページ: 63-71
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] New RNAi strategy for selective suppression of mutant allele in polyglutamine disease. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kubodera T, Yokota T, Ishikawa K, Mizusawa H
  • 雑誌名: Oligonucleotides 15 ページ: 298-302
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNA interference as a tool for producing knockdown mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Mitani T, Yokota T
  • 雑誌名: J Mamm Ova Res 22 ページ: 139-151
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] In vivo delivery of small interfering RNA targeting brain capillary endothelial cells (2005)
  • 著者名/発表者名: Hino T, Yokota T, Ito S, Nishina K, Kang Y-S, Mori S, Hori S, Kanda T, Terasaki T, Mizusawa H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Com 340 ページ: 263-267
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNA干渉を用いた神経疾患の遺伝子治療。 (2005)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 脳神経外科速報 15 ページ: 765-770
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNA干渉による神経変性疾患の遺伝子治療の現状。 (2005)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: Curr Insight Neurol Sci 13 ページ: 8-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiの神経変性疾患治療への応用。 (2005)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 細胞工学 24 ページ: 378-382
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiを用いたウイルス複製抑制。 (2005)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: ウイルス 55 ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] In vivo delivery of small interfering RNA targeting brain capillary endothelial cells (2005)
  • 著者名/発表者名: Hino T, Yokota T, Ito S, Nishina K, Kang Y -S, Mori S, Hori S, Kanda T, Terasaki T, Mizusawa H.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Com 340 ページ: 263-267
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Sequence-dependent and independent inhibition specific for mutant ataxin-3 by small interfering RNA. (2004)
  • 著者名/発表者名: Li Y, Yokota T, Taira K, Mizusawa H
  • 雑誌名: Ann Neurol 56 ページ: 124-129
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] siRNA-based inhibition of superoxide dismutase expression; potential use in familial Amyotrophic lateral sclerosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yokota T, Miyagishi M, Hino T, Matsumura R, Andria T, Urushidani M, Rao RV, Takahashi R, Bredesen DE, Taira K, Mizusawa H
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Com 314 ページ: 283-291
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] IRF-1 and IRF-2 distinctively up-regulate gene expression and production of IL-7 in human intestinal epithelial cells. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ohshima S, Nakamura T, Namiki S, Okada E, Tsuchiya K, Okamoto R, Yamazaki M, Yokota T, Kanai T, Watanabe M
  • 雑誌名: Mol Cell Biol 24 ページ: 6298-6310
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] High level expression of Human immunodeficiency virus type 1 Vif inhibits viral infectivity by modulating proteolytic processing of Gag precursor at the p2/NC processing site. (2004)
  • 著者名/発表者名: Akari H, M., Fujita S., Kao, MA., Khan M., Shehu-Xhilaga A, Adachi K
  • 雑誌名: J Biol Chem 279 ページ: 12355-12362
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Codon optimization of the HIV-1 vpu and vif genes stabilizes their messenger RNA and allows for highly efficient Rev-independent expression. Virology, (2004)
  • 著者名/発表者名: Nguyen KL, Llano M, Akari H M., Miyagi E, Poeschla EM, Strebel K, Bour S
  • 雑誌名: Virology 319 ページ: 163-175
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Expression of the HIV-1 accessory protein Vif is controlled uniquely to be low and optimal by proteasome-degradation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Fujita M, Akari H, Sakurai A, Yoshida A, Chiba T, Tanaka K, Strebel K, Adachi A
  • 雑誌名: Microbes and Infection 6 ページ: 791-798
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Ubiquitination of APOBEC3 proteins by the Vif-Cullin5-ElonginB-ElonginC complex. (2004)
  • 著者名/発表者名: Shirakawa K, Takaori-Kondo A, Kobayashi M, Tomonaga M, Izumi T, Fukunaga K, Sasada A., Abudu A., Miyauchi Y, Akari, Iwai K, Uchiyama T
  • 雑誌名: Virology 344 ページ: 263-266
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiを用いたC型肝炎の遺伝子治療。 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳, 水澤英洋
  • 雑誌名: Molecular Medicine 41 ページ: 36-43
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiを用いたウイルス性肝炎の遺伝子治療。 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 医学のあゆみ 208 ページ: 669-673
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiの医療への応用。 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 実験医学 22 ページ: 485-491
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] RNAiを用いた遺伝子治療の可能性。 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 臨床免疫 42 ページ: 494-498
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 神経変性疾患へのRNAiの臨床応用の展望。 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: 最新医学 21 ページ: 138-144
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 神経変性疾患研究におけるsiRNAを用いた遺伝子発現制御。 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳
  • 雑誌名: バイオインダストリー 21 ページ: 43-51
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] siRNA-based inhibition of superoxide dismutase expression ; potential use in familial Amyotrophic lateral sclerosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yokota T, Miyagishi M, Hino T, Matsumura R, Andria T, Urushidani M, Rao RV, Takahashi R, Bredesen DE, Taira K, Mizusawa H
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Com 314 ページ: 283-291
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] High level expression of Human immunodeficiency virus type 1 Vif inhibits viral infectivity by modulating proteolytic processing of Gag precursor at the p2/NC processing site. (2004)
  • 著者名/発表者名: Akari H, M.Fujita, S.Kao, MA.Khan, M.Shehu-Xhilaga, A.Adachi, K.Strebel
  • 雑誌名: J Biol Chem 279 ページ: 12355-12362
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Codon optimization of the HIV-1 vpu and vif genes stabilizes their messenger RNA and allows for highly efficient Rev-independent expression. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nguyen KL, Llano M, Akari H.Miyagi E, Poeschla EM, Strebel K, Bour S
  • 雑誌名: Virology 319 ページ: 163-175
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Transgenic siRNA increases the disease duration of ALS in a mouse model
  • 著者名/発表者名: Yokota T, Saito Y, Sasaguri H, Mitani T, Anzai M, Miyagishi M, Mizusawa H
  • 雑誌名: Arch Neurol (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] Non-viral gene therapy : Gene design and delivery. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokota T
  • 総ページ数: 398-404
  • 出版者: Springer-Verlag
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] RNA工学の最前線 (2005)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳, 仁科一隆
  • 総ページ数: 77-87
  • 出版者: RNAiの神経疾患への応用
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] 神経内科の最新医療 (2004)
  • 著者名/発表者名: 横田隆徳, 水澤英洋
  • 総ページ数: 43-48
  • 出版者: 先端医療技術研究
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より