ヒト型VEGF-Eキメラ遺伝子と自己骨髄幹細胞を用いた新規血管新生療法の開発

2005 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 16390221
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 室原 豊明 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90299503)
• 研究分担者: 近藤 隆久 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (00303644) ; 沼口 靖 名古屋大学, 医学部, 助教授 (90378224) ; 古森 公浩 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40225587) ; 渋谷 正史 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10107427)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• キーワード: 血管新生療法 / 血管再生療法 / 再生医学 / 遺伝子治療 / 成長因子 / 骨髄細胞 / 幹細胞 / 内皮前駆細胞

研究概要

VEGF-Aによる血管新生療法は、動物モデルでは一定の成果をあげていたが、臨床試験ではいずれも明確な効果は見られていない。これは、VEGF-Aによる血管新生効果とは別に、血管透過性亢進・炎症の惹起などVEGF-Aによる悪影響が生体に及ぼされたためと考えられる。本研究では、より副作用の少ないVEGF-E遺伝子治療による血管再生療法の基礎実験を行った。ラット下肢虚血モデルを用い、VEGF-Eキメラ#9遺伝子およびVEGF-Eキメラ#33遺伝子、ヒトVEGF-A遺伝子が挿入された発現プラスミド(pcDNA3.1+)各200ug、およびコントロールプラスミドを筋肉内に投与、遠隔期に新生血管量・血流量を測定、また新生血管の質をVEGF-A遺伝子や対照群と比較し、虚血性疾患に対する血管新生効果を評価した。各遺伝子の発現は投与された筋肉よりRT-PCR法により確認された。レーザードップラーによる下肢血流量は、VEGF-A群、VEGF-Eキメラ#9群およびVEGF-Eキメラ#33群において、コントロールプラスミド群に比し、有意な増加を認めた。また、組織学的評価による筋肉内の微小血管数は、VEGF-A群、VEGF-Eキメラ#9群およびVEGF-Eキメラ#33群において、コントロールプラスミド群に比し、有意な増加を認めた。さらに抗マクロファージ抗体であるED-1染色により、VEGF-Eキメラ#9群およびVEGF-Eキメラ#33群においては、VEGF-A群と比較し、有意に陽性細胞が少ない結果であった。さらに単球性細胞株、U937はVEGF-A刺激により遊走細胞数の増加、炎症性サイトカインIL-8、TNF-αの産生増加を認めたが、VEGF-E刺激による同反応は認められなかった。

研究成果

• [雑誌論文] Synergistic effect of combined intramyocardial CD34 cells and VEGF-2 gene therapy post-myocardial infarction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shintani S, Kusano K, Ii M, Iwakura A, Heyd L, Curry C, Wecker A, Gavin M, Ma H, Kearncy M, Silver M, Thorne T, Murohara T, Losordo DW
  • 雑誌名: Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. 3 ページ: S123-S128
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Combination therapy using angiopoietin-1 plasmid gene and autologous bone marrow cell implantation promotes functional angiogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi K, Kondo T, Inoue N, Aoki M, Mizuno M, Komori K, Yoshida J, Murohara T
  • 雑誌名: Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol (In press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Synergistic effect of combined intramyocardial CD34 cells and VEGF-2 gene therapy post-myocardial infarction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shintani S, Kusano K, Ii M, Iwakura A, Heyd L, Curry C, Wecker A, Gavin M, Ma H, Kearney M, Silver M, Thorne T, Murohara T, Losordo DW
  • 雑誌名: Nat.Clin.Pract.Cardiovasc.Med. 3 ページ: S123-S128
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Combination therapy using angiopoietin-1 plasmid gene and autologous bone marrow cell implantation promotes functional anigiogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi K, Kondo T, Inoue N, Aoki M, Mizuno M, Komori K, Yoshida J, Murohara T.
  • 雑誌名: Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Therapeutic neovascularization using cord blood-derived endothelial progenitor cells for diabetic neuropathy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Naruse K, Hamada Y, Nakashima E, Kato K, Mizubayashi R, Kamiya H, Yuzawa Y, Matsuo S, Murohara T, Matsubara T, Oiso Y, Nakamura J
  • 雑誌名: Diabete 54 ページ: 1823-1828
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Therapeutic angiogenesis with intramuscular injection of low dose recombinant granulocyte-colony stimulating factor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Lee M, Aoki M, Kondo T, Okumura K, Komori K, Murohara T
  • 雑誌名: Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol 25 ページ: 2535-2541
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Therapeutic neovascularization using cord blood-derived endothelial progenitor cells for diabetic neuropathy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Naruse K, Hamada Y, Nakashima E, Kato K, Mizubayashi R, Kamiya H, Yuzawa Y, Matsuo S, Murohara T, Matsubara T, Oiso Y, Nakamura J.
  • 雑誌名: Diabetes. 54 ページ: 1823-1828
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Therapeutic angiogenesis with intramuscular injection of low dose recombinant granulocyte-colony stimulating factor. (2005)
  • 著者名/発表者名: Lee M, Aoki M, Kondo T, Okumura K, Komori K, Murohara T.
  • 雑誌名: Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 25 ページ: 2535-2541
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Autologous bone-marrow mononuclear cell implantation improves endothelium-dependent vasodilation in patients with limb ischemia. (2004)
  • 著者名/発表者名: Higashi Y, Kimura M, Hara K, Noma K, Jituiki D, Nakagawa K, Oshima T, Chayama K, Goto C, Matsubara H, Murohara T, Yoshizumi M
  • 雑誌名: Circulation 109 ページ: 1215-1218
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Smoking cessation rapidly increases endothelial progenitor cells in peripheral blood in chronic smokers. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kondo T, Hayashi M, Kinoshita K, Kobayashi K, Iino S, Inden Y, Murohara T
  • 雑誌名: Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 24 ページ: 1442-1447
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Autologous bone-marrow mononuclear cell implantation improves endothelium-dependent vasodilation in patients with limb ischemia. (2004)
  • 著者名/発表者名: Higashi Y, Kimura M, Hara K, Noma K, Jituiki D, Nakagawa K, Oshima T, Chayama K, Goto C, Matsubara H, Murohara T, Yoshizumi M
  • 雑誌名: Circulation. 109 ページ: 1215-1218
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Smoking cessation rapidly increases endothelial progenitor cells in peripheral blood in chronic smokers. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kondo T, Hayashi M, Kinoshita K, Kobayashi K, Iino S, Inden Y, Murohara T.
  • 雑誌名: Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 24 ページ: 1442-1447
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より