SEREX法により発見した新規癌抗原遺伝子を分子標的とした食道癌の診断と治療

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16390372
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 落合 武徳 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (80114255)
• 研究分担者: 島田 英昭 千葉大学, 大学院医学研究院, 講師 (20292691) ; 日和佐 隆樹 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教授 (30260251) ; 朝長 毅 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教授 (80227644)
• キーワード: serex / TRIM21 / GLUT1 / myomegalin / 食道扁平上皮癌 / 腫瘍マーカー

研究概要

【背景と目的】食道癌関連抗原をSEREX (serological identification of antigens by recombinant cDNA expression cloning)法により同定・機能解析を行い、腫瘍マーカーとしての意義を明らかにする。
【方法】食道癌細胞株T.TnよりcDNAライブラリーを作製し、食道扁平上皮癌患者血清を用いてSEREX法によるスクリーニングを施行した。SEREX法を用い食道扁平上皮癌患者血清をスクリーニングし、新規の癌抗原としてmyomegalinを同定した。Myomegalin cDNAをGST-融合タンパク質発現ベクターpGEXに組換え、合成された融合タンパク質を精製してELISA法により血清抗体のレベルを測定した。我々はSEREX法を用い食道扁平上皮癌患者血清をスクリーニングし、計450クローン、325種類の癌抗原を同定した。得られたクローンについて、ウエスタン法により、複数の食道癌患者血清中に抗体の存在が確認された抗原クローンを選別した。次に、得られたcDNAをGST-融合タンパク質発現ベクターpGEXに組換え、合成された融合タンパク質を精製してELISA法により血清抗体のレベルを測定した。
【結果と考察】TRoP-2,GLUT-1/SLc2A1,TRIM21,Myomegalin等の抗原に対する抗体価は健常者血清に比べ、患者血清において有意に高いことが判明した。また、血清TRIM21抗体の存在は予後と、血清TROP2抗体の存在は腫瘍のサイズと関係していることがわかった。従って、これらの抗原は新規の腫瘍マーカーとなり、その血清抗体の解析は食道扁平上皮癌の診断に有用であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Serum anti-myomegalin antibodies in patients with esophageal squamous cell carcinoma (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimada H., Kuboshima M., Shiratori T., Nabeya Y., Takeuchi A., Takagi H., Nomura, F., Takiguchi, M., Ochiai, T., Hiwasa, T
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 30 ページ: 97-103
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Serological identification of antigens by recombinant cDNA expression cloning (SEREX) using antibodies from patients with esophageal squamous cell carcinoma (2006)
  • 著者名/発表者名: Hiwasa, T., Shimada, H., Ochiai, T., Takiguchi
  • 雑誌名: Moleculomics and Thereafte ページ: 99-117
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Presence of serum tripartite motif-containing 21 antibodies in patients with esophageal squamous cell carcinoma (2006)
  • 著者名/発表者名: Kuboshima, M., Shimada, H., Liu, T.L., Nomura, F., Takiguchi, M., Hiwasa, T., Ochiai, T
  • 雑誌名: Cancer Science 97 ページ: 380-386
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Proteomic analysis of primary esophageal squamous cell carcinoma reveals downregulation of a cell adhesion protein, periplakin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nishimori, T., Tomonaga, T., Matsushita, K., Oh-Ishi, M., Kodera, Y., Maeda, T., Nomura, F., Matsubara, H., Shimada, H., Ochiai
  • 雑誌名: Proteomics 6 ページ: 1011-1018
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Enhancement of chemosensitivity toward peplomycin by calpastatin-stabillized NF-kappaB p65 in esophageal carcinoma cells : possible involvement of Fas/Fas-L synergism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Liu, T.L., Shimada, H., Ochiai, T., Shiratori, T., Lin, S.E., Kitagawa, M., Harigaya, K., Maki, M., Oka, M., Abe, T., Takiguchi, M., Hiwasa, T.
  • 雑誌名: Apoptosis 11 ページ: 1025-1037
• [雑誌論文] An essential role of alternative splicing of c-myc suppressor FUSE-blinding protein-interacting repressor in carcinogenesis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Matsushita, K., Tomonaga, T., Shimada, H., Shioya, A., Higashi, M., Matsubara, H., Harigaya, K., Nomura, F., Libutti, D., Levens, D., Ochiai, T
  • 雑誌名: Cancer Res 66 ページ: 1409-1417