| 研究概要 |
疾病治療に必要な様々な情報を効率よく細胞に伝えるためのバイオデバイス「SBD結合人工セル」の開発を行った。「SBD結合人工セル」は、ゲノム創薬技術とコンピュータテクノロジーに基づいて設計されるstructure-based drug(SBD)と、それをデリバーする人工セルの2つのパーツから構成される。本年度は、まずFasやTRAILを鋳型にしたSBDをデザインし、これらを脳腫瘍細胞に添加して誘導される細胞死とそのシグナル伝達に関連したモレキュル(たとえばcaspase3,7,8、PARP、DNaseγ)の動きを、それぞれenzyme-immunoassay法、Western blot法並びに免疫蛍光法で調べた。その結果、当該モレキュルが、その鋳型としたFasやTRAILと同様のシグナルを細胞内に伝えうることを証明した。一方、人工セルの基盤となるリポソームについては、ホスファチジルセリン(PS)から成り、表面が陰性荷電したアニオニックリポオソームと、ホスファチジルコリン、PS及びコレステロールからなり、表面が中性であるニュートラルリポソーム、及びN-(α-トリメチルアンモニオアセチル)-ジドデシル-ジグルタメイトクロリド、ジラウロイルホスファチジルコリン及びジオレオイルホスファチジルエタノールアミンから成り、表面が陽性荷電したカチオニックリポソームの3種を調製した。各種リポソームを培養細胞に添加し、共焦点レーザー顕微鏡及びビデオ強化型微分干渉顕微鏡を用いて、その細胞内取り込みを観察した。その結果、カチオン性のリポソームが最も効率よく細胞内に取り込まれた。さらに2つのパーツを結合させる方法のひとつとしてボルテクス法を考案し、その結合効率を調べた。その結果、結合蛋白の極性を整える新たな方法の開発が必要であることがわかった。
|
