間節リウマチ破骨細胞特異的に発現する遺伝子の同定

2005 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 16390447
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 整形外科学
• 研究機関: 独立行政法人国立病院機構(相模原病院臨床研究センター)
• 研究代表者: 鈴木 隆二 独立行政法人国立病院機構(相模原病院臨床研究センター), 室長 (70373470)
• 研究分担者: 福井 尚志 独立行政法人 国立病院機構 相模原病院, 部長 (10251258) ; 越智 隆弘 独立行政法人国立病院機構(相模原病院), 病院長 (80112035)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• キーワード: 関節リウマチ / 破骨細胞 / ナース細胞 / 遺伝子解析 / 炎症 / 骨破壊 / DNAチップ

研究概要

はじめに:
関節リウマチ(RA)の罹患関節部および骨髄中には、ナース機能を有する間葉系細胞(RAナース細胞)が特徴的に存在する事を報告し、本細胞がRA病態形成に深く関与する事を示唆してきた。RAナース細胞と単球の共培養により、ヒト破骨細胞前駆細胞が誘導され、炎症性サイトカイン(IL-3,-5,-7,GM-CSF)で高度に破骨機能を有する成熟破骨細胞が分化・成熟し、RAにおける骨破壊の特異性を検討した。
目的:
ヒト破骨細胞特異的遺伝子の探索を目的とした。
結果:
1.炎症性サイトカイン誘導破骨細胞(RA破骨細胞)とRANKL/M-CSF誘導破骨細胞(従来型破骨細胞)の相違:二種類の破骨細胞で、RA破骨細胞はMMP-12を特異的に発現し、RA患者の罹患関節部を用いた免疫組織学的検討から、MMP-12陽性破骨細胞が50%〜10%存在している事を確認した。
2.破骨細胞特異的遺伝子の探索:RAナース細胞によるヒト破骨細胞前駆細胞の純粋培養が確立され、ヒト破骨細胞誘導系の全てを試験管内で操作する事が可能と成った。単球、破骨細胞前駆細胞、RA破骨細胞、従来型破骨細胞の夫々に特異的に発現する遺伝子について、二種類のSubtraction(IRDA法・SSH-RDA法)、さらに、DNAチップ解析により発現プロファイルの検討を行った。Subtraction法により、破骨細胞に特異的に発現する新規遺伝子OC89,7-44を選択した。さらに、DNAチップ解析によって、RA破骨細胞に特異的発現をする25種類の遺伝子を確認した。以上から、RAナース細胞により誘導された破骨細胞前駆細胞を経由する二種類の破骨細胞が存在する。RA破骨細胞は、従来型破骨細胞と異なる遺伝子発現を有する事が確認された。
考察:
ヒト破骨細胞の多様性とRA病態を説明し得る破骨細胞の分化機構が明らかと成った。

研究成果

• [雑誌論文] Effect of GDF-5 on ligament healing (2006)
  • 著者名/発表者名: Tashiro T, Hiraoka H, Ikeda Y, Ohnuki T, Suzuki R, Ochi T, Nakanura K, Fukui N.
  • 雑誌名: J Orthop Res. 24・1 ページ: 71-79
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] リウマチの破骨細胞 (2006)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 隆二
  • 雑誌名: 臨床整形外科 41・3 ページ: 260-263
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 関節リウマチにみられる特異な破骨細胞分化機序 (2006)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 隆二, 前田 朋子, 越智 隆弘
  • 雑誌名: Rheumatology Clinical Update (印刷中)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Limited VH gene usage in B-cell clones established with nurse-like cells from patients with rheumatoid arthritis (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakanura-Kikuoka S, Takahi K, Tsuboi H, Toyosaki-Maeda T, Maeda-Tanimura M, Wakasa C, Kikuchi N, Norioka S, Iwasaki M, Matsutani T, Itoh T, Yamane S, Takemoto H, Shimaoka Y, Yukioka M, Suzuki R, Ochi T
  • 雑誌名: Rheumatology (Oxford) 45-5 ページ: 549-557
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Production of interleukin-6 and interleukin-8 by nurse-like cells from rheumatoid arthritis patients after stimulation with monocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Mori T, Juji T, Suzuki S, Watanabe J, Goto A, Shiobara N, Yamane S, Fukui N, Suzuki R, Ochi T
  • 雑誌名: Mod Rheumatol. 15 ページ: 415-422
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Effect of GDF-5 on ligament healing (2006)
  • 著者名/発表者名: Tashiro T, Hiraoka H, Ikeda Y, Ohnuki T, Suzuki R, Ochi T, Nakanura K, Fukui N.
  • 雑誌名: J Orthop Res 24-1 ページ: 71-79
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Limited VH gene usage in B-cell clones established with nurse-like cells from patients with rheumatoid arthritis (2005)
  • 著者名/発表者名: Nakanura-Kikuoka S, Takahi K, Tsuboi H, Toyosaki-Maeda T, Maeda-Tanimura M, Wakasa C, Kikuchi N, Norioka S, Iwasaki M, Matsutani T, Itoh T, Yamane S, Takemoto H, Shimaoka Y, Yukioka M, Suzuki R, Ochi T.
  • 雑誌名: Rheumatology(Oxford). 45・5 ページ: 549-557 Epub 2005 Dec 20
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Production of interleukin-6 and interleukin-8 by nurse-like cells from rheumatoid arthritis patients after stimulation with monocytes (2005)
  • 著者名/発表者名: Tanaka K, Mori T, Juji T, Suzuki S, Watanabe J, Goto A, Shiobara N, Yamane S, Fukui N, Suzuki R, Ochi T.
  • 雑誌名: Mod Rheumatol 15 ページ: 415-422
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Evidence for existence of ologoclonal tumor-infiltrating lymphocytes and predominant production of T helper 1/T cytotoxic 1 type cytokines in gastric an dcolorectal tumors. (2004)
  • 著者名/発表者名: Matsutani T, Shiiba K, Yoshioka T, Tsuruta Y, Suzuki R, Ochi T, Itoh T, Musha T, Mizori T, Sasaki I.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 25・1 ページ: 133-141
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Evidence for existence of oligoclonal tumor-infiltrating lymphocytes and predominant production of T helper 1/T cytotoxic 1 type cytokines in gastric and colorectal tumors. (2004)
  • 著者名/発表者名: Matsutani T, Shiiba K, Yoshioka T, Tsuruta Y, Suzuki R, Ochi T, Itoh T, Musha T, Mizori T, Sasaki I.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 25-1 ページ: 133-141
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] comparison of the activities of multinucleated bone-resorbing giant cells derived from CD14-positive cells in the synovial fluids of rheumatoid arthritis and osteoarthritis patients. (2003)
  • 著者名/発表者名: Takano H, Tomita T, Toyosaki-Maeda T, Maeda-Tanimura M, Tsuboi H, Takeuchi E, Kaneko M, Shi K, Takahi K, Myoui A, Yoshikawa H, Takahashi T, Suzuki R, Ochi T.
  • 雑誌名: Rheumatology(Oxford). 43・4 ページ: 435-441
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Comparison of the activities of multinucleated bone-resorbing giant cells derived from CD14-positive cells in the synovial fluids of rheumatoid arthritis and osteoarthritis patients. (2003)
  • 著者名/発表者名: Takano H, Tomita T, Toyosaki-Maeda T, Maeda-Tanimura M, Tsuboi H, Takeuchi E, Kaneko M, Shi K, Takahi K, Myoui A, Yoshikawa H, Takahashi T, Suzuki R, Ochi T.
  • 雑誌名: Rheumatology (Oxford) 43-4 ページ: 435-441
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [産業財産権] Methods for isolation of Osteoclast precursor cells and inducing their differentiation in to Osteoclasts (2000)
  • 発明者名: Tomoko Maeda, Ryuji Suzuki, Takahiro Ochi
  • 権利者名: Shionogi&Co.,Ltd.
  • 産業財産権番号: 特許取得PatentNo.:US6,861,257 B1
  • 出願年月日: 2000-10-10
  • 取得年月日: 2005-03-01
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より