| 研究課題/領域番号 |
16570043
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
植物生理・分子
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| 研究機関 | 独立行政法人農業・生物系特定産業技術研究機構 |
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研究代表者 |
山口 武志 独立行政法人農業・生物系特定産業技術研究機構, 中央農業総合研究センター・北陸地域基盤研究部, チーム長 (40243604)
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| 研究分担者 |
渋谷 直人 明治大学, 農学部, 教授 (70350270)
南 栄一 独立行政法人農業生物資源研究所, 生体高分子研究グループ, チーム長 (70373256)
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| 研究期間 (年度) |
2004 – 2005
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| キーワード | イネ / リン脂質 / エリシター / 過酸化水素 / Phospholipase D / プロテインキナーゼ / 登熟 / RNA干渉 |
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| 研究概要 |
1、イネの防御反応に関わる研究
イネ(日本晴)培養細胞を用いた系において過酸化水素(H_2O_2)がPhospholipase D(PLD)を活性化することを発見した。この活性化はイネ培養細胞抽出画分のうち細胞質画分においてカルシウムイオン非存在下で起こり、活性化したPLDが細胞質から細胞膜に移行することが認められた。このPLDのIn vitroの活性化にはATPが必要であり、Protein tyrosine kinase (PTK)の阻害剤であるLavendustin Aにより完全に阻害されたことからPLDの活性化にPTKが関わっていることが示唆された。イネ培養細胞のエリシター(N-acethylchitooligosaccharide)によるファイトアレキシン(Momilactone A)の誘導はH_2O_2存在下で大幅に増加するが、活性酸素のスカベンジャーであるTiron、PTKの阻害剤であるLavendustin A、PLDの阻害剤であるI-Butanol(0.1%)、それぞれの存在下で大幅に減少することから、H_2O_2とPLDがイネのエリシターによるファイトアレキシンの誘導に深く関わっていることが示唆された。
2、イネの登熟過程に関わる研究
登熟過程の種子のPLD活性を解析した結果、出穂開花後15日までの前期に少なくとも2種類の異なるPLDが活性化されることを発見した。登熟前期に発現するPLD遺伝子をPLD遺伝子の特異プライマーを用いたRT-PCRで解析した結果、主に4種類のPLD遺伝子が強く発現していることがわかった。これらのPLD遺伝子のRNA干渉用ベクターを構築し、アグロバクテリウム法でイネカルスに導入し、それぞれのRNA発現抑制系統を作出した。現在その表現型を解析中である。
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