| 研究課題/領域番号 |
16570105
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| 研究機関 | (財)東京都医学研究機構 |
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研究代表者 |
田井 直 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 参事研究員 (70112092)
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| 研究分担者 |
川島 育夫 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (40146824)
小倉 潔 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (70233492)
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| キーワード | 糖鎖 / 糖蛋白質の品質管理 / 小胞体関連分解 |
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| 研究概要 |
本研究は小胞体における糖蛋白質の品質管理の結果、細胞質に逆行輸送されたミスフォールド蛋白質やポリマー形成不全蛋白質のN型糖鎖、特に高マンノース型糖鎖の新規な機能解析を目的とする。私共によって発見されたN型糖鎖を認識するユビキチンリガーゼ群(Fbx2やFbx6b)は、糖鎖が糖蛋白質の品質管理、特に小胞体関連分解(ERAD)への関与を明確に示した。この成果は、糖鎖の機能解明には糖鎖結合蛋白質の解析が非常に有効であることを端的に示している。細胞質へ逆行輸送されたミスフォールド糖蛋白質は、最終的にユビキチン・プロテアソーム系によって分解される。しかし、その前にN-グリコシダーゼ(PNGase)やエンドH型酵素によって蛋白質と遊離オリゴ糖に分離される。この糖鎖は、細胞質のα-マンノシダーゼによってMan_5GlcNAcにまで分解され、最終的にリソソームに取り込まれることが報告されている。従来、糖蛋白質より切り出されたN型オリゴ糖鎖は、最終的にリソソームに存在する特異的なトランスポーターによって取り込まれると想定されている。しかしながら、トランスポーターの存在を含めてこの機構は現在までに全く実証されていない。平成16年度は、マウスやラット脳の細胞質画分を材料にして、糖蛋白質からPNGaseやエンドH型酵素によって切り出されたオリゴ糖の結合蛋白質の単離・精製を試みた。種々の高マンノース型糖鎖をプローブとして解析しているが、現在まで単離・同定に至っていない。平成17年度には、この蛋白質を単離・同定し、その後、分子生物学、生化学、免疫学的手法等を用いて、糖鎖結合蛋白質の特性を解析する予定である。さらに、この結合蛋白質の受容体をこの存在が想定されるリソソームなどの細胞内小器官より検出することを目指している。
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