| 研究課題/領域番号 |
16580067
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| 研究機関 | 産業医科大学 |
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研究代表者 |
古賀 洋介 産業医科大学, 医学部, 教授 (70012458)
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| 研究分担者 |
森井 宏幸 産業医科大学, 医学部, 助教授 (60141743)
藤 博幸 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (70192656)
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| キーワード | 古細菌 / イノシトールリン脂質 / 糖脂質 / 微生物 / 生合成 / 系統樹 / 進化 / テトラエーテル型脂質 |
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| 研究概要 |
1 酵母のphosphatidylinositol synthaseとホモロガスなタンパク質がゲノム上に検出されているので、archaetidylinositol synthaseはCDP-archaeolとmyoinositolから合成されると予想して、酵母の活性測定法を基本にMethanothermobacter thermautotrophicusの細胞破砕液に類似反応を試みた。基質として、CDP-飽和archaeol, CDP-不飽和archaeol、界面活性剤、金属イオンの種類などの反応条件を変えて検討したが、いずれも活性が検出されなかった。
2 Archaeidylinositol合成活性が検出されない原因として、反応形式が酵母などのものとは異なる可能性を考えて、基質となるmyodnositolを生成する活性があるかどうか調べた。Glucose-6-phosphateから1L-myoinositol-1-phosphateを生成する活性を細胞破砕液中に検出した。CDP-inositolとarchaeolからarchaetidylinositolが生成する場合は、1D-myo-inositol-1-phophateでなければならないので、上のことからarchaetidylinositol合成反応は予想したとおりの形式で妥当と推定された。
3 糖脂質合成について。Monoglucosylarchaeol 2分子からdiglucosylarchaeolとarchaeolが生成するglucosyltransferaseの活性が存在する可能性を考慮して、monoglucosylarchaeolと細胞破砕液をUDP-glucose無しで反応させたが、diglucosylarchaeolは生成せず、上の可能性は否定された。
4 in vitroでの酵素による糖脂質生合成の生成物の糖鎖の立体構造についてNMRにより調べた結果、菌体由来の天然糖脂質のものと同一であることを確認した。
5 この研究で発見された糖脂質合成活性はテトラエーテル型脂質にも高い活性を示し、根本らのterbinafine阻害実験によるin vivoテトラエーテル型脂質生合成の機構をin vitroで支持した。
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