| 研究概要 |
近年、脈管新生が悪性腫瘍の増殖・浸潤・転移に重要な役割を演じていることが注目され、多くの脈管内皮細胞増殖因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)およびその受容体との関連性が議論されてきている。リンパ管の新生・再生に関与するVEGF-Cおよび受容体VEGFR-3/Flt-4は腫瘍の進展・転移との関わりのみならず、動脈硬化、糖尿病性網膜症、関節リウマチ、リンパ浮腫など多くの病態生理的現象との関連性において興味深い因子である。本研究の初年度(H16年度)ではおもに1)腫瘍組織内(含正常部)における毛細リンパ管の形態と微細分布、2)腫瘍リンパ管増殖・新生の機序とその意義の2つについて検討した。
手術により摘出されたヒト唾液腺、胃・腸管の一部を採取し、組織ブロックおよび実体顕微鏡下で剥離伸展試を作製した。これらの試料はすべて、大分大学医学部およびMarburg大学(Prof.J.A.Werner)の両施設のものである。収集された各試料は、毛細リンパ管の特異マーカーを用い酵素組織染色(5'-nucleotidase染色)および免疫組織化学染色(CD73,hyaruronan receptor, LYVE-1, Vascular endothelial growth factor VEGF-C,およびその受容体VEGFR-3)、ポドプラニン、in situ hybridization法等を施した。すなわち、腫瘍等組織を上記組織化学反応後、光学顕微鏡、共焦点レーザー蛍光顕微鏡、走査電子顕微鏡で観察し、リンパ管内皮細胞の動態と機能形態を観察した(Shimoda et al.2004, Ji et al.,2004,Qu et al.2004)。
とくに、組織化学反応後の組織ブロックを、これまで開発・応用している酵素・免疫組織化学SEM法を駆使し、微小循環系の三次元立体構築を明らかにした(下田他 2004,梶原他 2004)。
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