プロテアーゼ活性化受容体2の生体内分布と動脈硬化発生・進展における役割

2005 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 16590321
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 丸塚 浩助 宮崎大学, 医学部, 助教授 (00239154)
• 研究分担者: 浅田 祐士郎 宮崎大学, 医学部, 教授 (70202588) ; 畠山 金太 宮崎大学, 医学部, 講師 (60325735) ; 山下 篤 宮崎大学, 医学部, 助手 (90372797)
• 研究期間 (年度): 2004 – 2005
• キーワード: PAR2 / 血栓形成 / 内膜肥厚モデル / 骨髄移植モデル / 生体内分布

研究概要

1)血栓の組成の検討:人体における血栓およびそれに伴う血栓の器質化/内膜肥厚の組成を確認するために、心筋梗塞症例病理解剖例において、責任冠状動脈における血栓の組成を検討した。その結果、プラーク破裂症例ではフィブリン優位の血栓が形成され、プラークびらん症例では血小板優位であるがいずれの場合でも混合血栓であることがあきらかとなった。(Heart,2005)この結果は、動脈硬化発生の基盤となる内膜肥厚巣の形成の初期には内膜肥厚の成長因子として血小板のみならず、フィブリン血栓を形成する凝固因子の関与が示唆された。(J Atheroscl Thromb,2005)
2)PAR2のマウスおよびヒトにおける生体内分布の検討:C57BL/6マウスおよびPAR2ノックアウトマウスより全身の組織を採取、10%ホルマリンおよび4%パラホルムアルデハイドによる固定後のパラフィン切片および凍結組織からの凍結切片において作製済みの抗マウスPAR2活性化ペプチドに対する抗血清および市販のPAR2に対する特異抗体を用いた免疫組織学的検討を行ったが、両者に差異は無く、抗体および抗血清のマウス組織における免疫組織学的検索に適していないことが考えられた。また、死後6時間以内の剖検例より全身各臓器を採取し、薄切凍結切片における免疫組織学的に同様に検討したが、平滑筋細胞・消化管上皮に発現を認めるものの、PAR2の存在様式とは染色性が異なっており信頼性に乏しく、マウス同様、明確な細胞局在を見出し得なかった。
3)骨髄移植マウスにおける検討:致死量放射線照射を必要としない骨髄移植法を用い、GFPマウスの骨髄細胞を、雄性C57BL/6に移植後、ナイロン糸留置法にて血栓/内膜肥厚モデルを作製し、血栓の器質化/内膜肥厚に関与する細胞の特性を同定した。骨髄移植生着確認後、ナイロン糸留置後4週目に蛍光顕微鏡下にGFP陽性細胞の関与を検討したが、同部位への骨髄由来GFP陽性細胞は極少数に留まり、ほとんど関与しないことがあきらかとなった。(論文作成中)

研究成果

• [雑誌論文] Co-localization of von Willebrand factor with platelet thrombi, tissue factor and platelets with fibrin, and consistent presence of inflammatory cells in coronary thrombi obtained by an aspiration device from patients with acute myocardial infarction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hoshiba Y, Hatakeyama K, Tanabe T, Asada Y, Goto S
  • 雑誌名: Journal of Thrombosis and Haemostasis 4(1) ページ: 114-120
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Inhibition of 5-hydroxytryptamine receptor prevents occlusive thrombus formation on neointima of the rabbit femoral artery. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nishihira K, Yamashita A, Tanaka N, Kawamoto R, Imamura T, Yamamoto R, Eto T, Asada Y
  • 雑誌名: Journal of Thrombosis and Haemostasis 4(1) ページ: 247-255
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Detection of von Willebrand factor and tissue factor in platelets-fibrin rich coronary thrombi in acute myocardial infarction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yamashita A, Sumi T, Goto S, Hoshiba Y, Nishihira K, Kawamoto R, Hatakeyama K, Date H, Imamura T, Ogawa H, Asada Y
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 97(1) ページ: 26-28
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Adrenomedullin in mast cells of abdominal aortic aneurysm. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tsuruda T, Kato J, Hatakeyama K, Yamashita A, Nakamura K, Imamura T, Kitamura K, Onitsuka T, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: Cardiovascular Research 70(1) ページ: 158-164
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Different inflammatory response and oxidative stress in neointimal hyperplasia after balloon angioplasty and stent implantation in cholesterol-fed rabbits. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kawamoto R, Yamashita A, Nishihira K, Furukoji E, Hatakeyama K, Ishikawa T, Imamura T, Itabe H, Eto T, Asada Y
  • 雑誌名: Pathology Research and Practice (in press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] 【虚血性心疾患2006】心と脳の動脈硬化 (2006)
  • 著者名/発表者名: 畠山金太, 丸塚浩助, 山下篤, 浅田祐士郎, 住吉昭信
  • 雑誌名: 成人病と生活習慣病 35(10) ページ: 1088-1096
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] 動脈硬化性血栓の成長における血管壁の凝固活性と血流の関与 (2006)
  • 著者名/発表者名: 山下 篤
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会雑誌 17(1) ページ: 29-37
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Role of thrombogenic factors in the development of atherosclerosis (2005)
  • 著者名/発表者名: Marutsuka K, Hatakeyama K, Yamashita A, Asada Y
  • 雑誌名: Journal of Atherosclerosis and Thrombosis 12(1) ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Adenovirus-mediated transfer of human placental ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase to vascular smooth muscle cells suppresses platelet aggregation in vitro and arterial thrombus formation in vivo. (2005)
  • 著者名/発表者名: Furukoji E, Yamashita A, Marutsuka K, Hatakeyama K, Asada Y
  • 雑誌名: Circulation 111(6) ページ: 808-815
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Proportion of fibrin and platelets differs in thrombi on ruptured and eroded coronary atherosclerotic plaques in humans. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sato Y, Hatakeyama K, Yamashita A, Marutsuka K, Asada Y.
  • 雑誌名: Heart 91(4) ページ: 526-530
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Relation of CD39 to plaque instability and thrombus formation in directional atherectomy specimens from patients with stable and unstable angina pectoris. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hatakeyama K, Asada Y.
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 90(5) ページ: 632-635
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Detection of von Willebrand factor and tissue factor in platelets-fibrin rich coronary thrombi in acute myocardial infarction. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yamashita A, Hatakeyama K, Asada Y
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 97(1) ページ: 26-28
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Role of thrombogenic factors in the development of atherosclerosis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Marutsuka K, Hatakeyama K, Yamashita A, Asada Y
  • 雑誌名: Journal of Atherosclerosis and Thrombosis 12(1) ページ: 1-8
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Proportion of fibrin and platelets differs in thrombi on ruptured and eroded coronary atherosclerotic plaques in humans. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sato Y, Hatakeyama K, Yamashita A, Marutsuka K, Sumiyoshi A, Asada Y
  • 雑誌名: Heart 91(4) ページ: 526-530
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Adenovirus-mediated transfer of human placental ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase to vascular smooth muscle cells suppresses platelet aggregation in vitro and arterial thrombus formation in vivo. (2005)
  • 著者名/発表者名: Furukoji E, Matsumoto M, Yamashita A, Yagi H, Sakurai Y, Marutsuka K, Hatakeyama K, Morishita K, Fujimura Y, Tamura S, Asada Y
  • 雑誌名: Circulation 111(6) ページ: 808-815
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Relation of CD39 to plaque instability and thrombus formation in directional atherectomy specimens from patients with stable and unstable angina pectoris. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hatakeyama K, Hao H, Imamura T, Ishikawa T, Shibata T, Fujimura Y, Eto T, Asada Y
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 95(5) ページ: 632-635
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] C-reactive protein in atherosclerotic lesions : its origin and pathophysiological significance. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sun H, Koike T, Ichikawa T, Hatakeyama K, Shiomi M, Zhang B, Kitajima S, Morimoto M, Watanabe T, Asada Y, Chen YE, Fan J
  • 雑誌名: American Journal of Pathology 167(4) ページ: 1139-1148
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Adrenomedullin alleviates not only neointimal formation but also perivascular hyperplasia following arterial injury in rats. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tsuruda T, Kato J, Matsui E, Hatakeyama K, Masuyama H, Imamura T, Kitamura K, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: European Journal of Pharmacology 508(1-3) ページ: 201-204
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Antifibrotic effect of adrenomedullin on coronary adventitia in angiotensin II-induced hypertensive rats. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tsuruda T, Kato J, Hatakeyama K, Masuyama H, Cao YN, Imamura T, Kitamura K, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: Cardiovascular Research 65 ページ: 921-929
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] 【Vascular Biologyからみた血栓・線溶系】病理学的見地からみた血栓・線溶系の役割 (2005)
  • 著者名/発表者名: 丸塚浩助, 畠山金太, 浅田祐士郎
  • 雑誌名: 分子心血管病 6(1) ページ: 19-26
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Increased vascular wall thrombogenicity combined with reduced blood flow promotes occlusive thrombus formation in rabbit femoral artery. (2004)
  • 著者名/発表者名: Yamashita A, Furukoji E, Marutsuka K, Hatakeyama K, Yamamoto H, Tamura S, Ikeda Y, Sumiyoshi A, Asada Y
  • 雑誌名: Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology 24(12) ページ: 2420-2424
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Disruption of autosomal recessive hypercholesterolemia gene shows different phenotype in vitro and in vivo. (2004)
  • 著者名/発表者名: Harada-Shiba M, Takagi A, Marutsuka K, Moriguchi S, Yagyu H, Ishibashi S, Asada Y, Yokoyama S
  • 雑誌名: Circulation Research 95(9) ページ: 945-952
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Adrenomedullin administration immediately after myocardial infarction ameliorates progression of heart failure in rats. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakamura R, Kato J, Kitamura K, Onitsuka H, Imamura T, Cao Y, Marutsuka K, Asada Y, Kangawa K, Eto T
  • 雑誌名: Circulation 110(4) ページ: 426-431
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Relation of C-reactive protein to restenosis after coronary stent implantation and to restenosis after coronary atherectomy. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kawamoto R, Hatakeyama K, Imamura T, ishikawa T, Date H, Shibata Y, Takenaga M, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 94 ページ: 104-107
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Possible contribution of C-reactive protein within coronary plaque to increasing its own plasma levels across coronary circulation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa T, Imamura T, Hatakeyama K, Date H, Nagoshi T, Kawamoto R, Matsuyama A, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 93 ページ: 611-614
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Increased adrenomedullin immunoreactivity and mRNA expression in coronary plaques obtained from patients with unstable angina. (2004)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa T, Hatakeyama K, Imamura T, Ito K, Hara S, Date H, Shibata Y, Hikichi Y, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: Heart 90 ページ: 1206-1210
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Adrenomedullin induces matrix metalloproteinase-2 activity in rat aortic adventitial fibroblasts. (2004)
  • 著者名/発表者名: Tsuruda T, Kato J, Cao YN, Hatakeyama K, Masuyama H, Imamura T, Kitamura K, Asada Y, Eto T
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 325 ページ: 80-84
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] 別冊医学のあゆみ 血液疾患-state of arts-(分担) (2005)
  • 著者名/発表者名: 丸塚浩助, 浅田祐士郎
  • 総ページ数: 798
  • 出版者: 医歯薬出版株式会社
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より