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血管新生抑制因子caspin/PEDFにより誘導される血管内皮細胞のアポトーシスの分子機序を明らかにするため、添加前後の血管内皮細胞について、マイクロアレー法によりアポトーシス誘導シグナルに関わる遺伝子の解析を行うこととしていたが、大腸菌組換えcaspin/PEDFを用いた解析では、大腸菌由来LPSの混入が影響を及ぼしていることが示唆されたため、mouse培養細胞から精製したnative typeのcaspin/PEDFや市販品のBHK細胞培養液中に発現されたヒト組換えPEDFを用いることに予定を変更した。ヒトにおける発現解析を行うために、ヒト由来のSV40不死化内皮細胞HMEC-1及びprimary human micro vascular endotheliaについて、市販品のヒト組換えPEDFを用いてアポトーシス誘導の解析を行ったが、これらの細胞に対する有意なアポトーシス誘導が検出できなかった。mouse培養細胞からnative typeのcaspin/PEDFを精製しているが、マイクロアレー解析に必要な量が得られていない。
内軟骨骨化の分子機序を明らかにするために、マウスにおけるcaspin/PED発現について、以前行った免疫組織学的解析に加えて、in situ hybridizationによる詳しい解析を行った。内軟骨骨化の進行に伴い形成される肥大軟骨細胞ではcaspin/PEDは消失し、血管侵入抑制が解除されるのに相応した所見を示した。また、この時期には骨膜や骨皮質へ分化する骨外縁に沿った部位にcaspinが強く発現し、この部位における血管の侵入を抑制していると考えられた。
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