マクロファージのphospholipaseA2依存性殺菌メカニズムに関する研究

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16590358
• 研究機関: 島根大学
• 研究代表者: 冨岡 治明 島根大学, 医学部, 教授 (40034045)
• 研究分担者: 佐野 千晶 島根大学, 医学部, 講師 (70325059) ; 清水 利朗 島根大学, 医学部, 助手 (60284030)
• キーワード: phospholipase A2 / 抗酸菌 / マクロファージ / リン酸化蛋白 / ファゴゾーム

研究概要

本研究は,抗酸菌の菌体や菌体成分による活性化シグナルにより誘導されるマクロファージ(Mφ)のcPLA_2のpahosome膜へのtranslocationとリン酸化による活性化現象に焦点を当て,そのメカニズムを解明しようとするものである。前年度の検討に引き続いて,特に抗酸菌の貪食による活性化シグナルにより誘導されるMφのcPLA_2のpahosome膜へのtranslocationのプロフィールについての検討を進めた。本年度の一連の検討により,(1)Mφの結核菌に対する抗菌活性はATPで増強されるが,この効果はcPLA_2阻害剤のa-TFMKでブロックされること,(2)Mφの細胞膜のアラキドン酸のpahosome内局在結核菌へのtranslocationはa-TFMKで阻害されること,また共焦点レーザースキャン法による観察では,(3)マウス腹腔MφにMAC菌を感染させた場合には,cPLA_2のpahosome内局在菌へのtranslocationが認められるが,この現象はATPを作用させることでup-regulateされること,(4)cPLA_2α-GFP発現プラスミドで形質転換したCHO細胞あるいはCD36+CHO細胞にMAC菌を感染させると,強毒菌と弱毒菌の別なく,12〜24時間でpahosome内局在MAC菌体へのcPLA_2 α-GFPのtranslocationが強く認められることが明らかになった。現在は,cPLA_2α中のセリン残基のリン酸化がcPLA_2のtranslocationにどのような影響を及ぼすのかについて検討するために,S505A,S515A,S727Aの各変異体cPLA_2α-GFPを発現するプラスミドを調製するための検討を進めつつある。

研究成果

• [雑誌論文] Antimicrobial activity of picolinic acid against extracellular and intracellular Mycobacterium avium complex and its combined activity with clarithromycin, rifampicin, and fluoroquinolones (2006)
  • 著者名/発表者名: Cai SS, Sato K, Shimizu T, Yamabe S, Hiraki M, Sano C, Tomioka H
  • 雑誌名: Journal of Antimicrobial Chemotherapy 57・1 ページ: 85-93
• [雑誌論文] Comparative studies on the roles of mediator molecules in expression of the suppressor activity of Mycobacterium avium complex-induced immunosuppressive macrophages against T cell and B cell mitogenic responses (2006)
  • 著者名/発表者名: Cai S, Shimizu T, Tomioka H
  • 雑誌名: Clinical and Experimental Immunology 143・3 ページ: 560-571
• [雑誌論文] 結核化学療法の今後は明るいか? (2006)
  • 著者名/発表者名: 冨岡治明, 清水利朗
  • 雑誌名: 最新医学 61・2 ページ: 249-257
• [雑誌論文] Development of new antituberculous drugs : strategies for new drug targets and drug delivery (2005)
  • 著者名/発表者名: Tomioka H
  • 雑誌名: Drug Design Reviews 2 ページ: 427-437
• [雑誌論文] 抗酸菌感染症の免疫補助療法 (2005)
  • 著者名/発表者名: 冨岡治明, 佐藤勝昌, 清水利朗, 佐野千晶
  • 雑誌名: 日本細菌学雑誌 60・3 ページ: 445-452
• [雑誌論文] Effects of type II alveolar epithelial cells on T cell mitogenic responses to concanavalin A and purified protein derivatives (2005)
  • 著者名/発表者名: Sato K, Shimizu T, Sano C, Tomioka H
  • 雑誌名: Microbiology and Immunology 49・10 ページ: 885-890
• [雑誌論文] Combined effects of ATP on the therapeutic efficacy of antimicrobial drug regimens against Mycobacterium avium complex infection in mice and roles of cytosolic phospholipase A_2-dependent mechanisms in the ATP-mediated potentiation of antimycobacterial host resistance (2005)
  • 著者名/発表者名: Tomioka H, Sano C, Sato K, Ogasawara K, Akaki T, Sano K, Cai SS, Shimizu T
  • 雑誌名: Journal of Immunology 175 ページ: 6741-6749
• [雑誌論文] Current status of some antituberculosis drugs and the development of new antituberculous agents with special reference to their in vitro and in vivo antimicrobial activities
  • 著者名/発表者名: Tomioka H
  • 雑誌名: Current Pharmaceutical Design (in press)