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対象症例よりヘパリン加静脈血を採取、重層遠心法にてリンパ球を分離し、RPMI1640+10%FCS培地に懸濁した後、Rhodamine123(Rh123)を培地に加え、15分間培養。洗浄後、Rh123非含有の同培地にて、上記条件下で120分間培養した。この際、トランスポーター遮断作用を有するverapamil添加と非添加のもので培養した。Phycoerythrin標識mouse-IgG抗ヒトCD3抗体にて染色し、FlowcytometerにてRh123含有細胞率を計測した。
同一症例において、ステロイド薬投与量が高値である程、CD3^+細胞中のRhodamine123^+細胞の割合は低値を示していた。そのため、本研究はステロイド投与量をほぼ同程度として検討する必要があることが示唆された。
特発性ネブローゼ症候群(微小変化型ネフローゼ症候群・巣状糸球体硬化症)における末梢血リンパ球数およびCD3^+細胞の割合は、ステロイド依存性群:ステロイド薬減量中に再発した症例とステロイド非依存性群:ステロイド薬中止後1年以降に再発した症例の2群間に有意差を認めなかった。京た、Rh123のCD^3+細胞内への取り込み(verapamil添加)は、2群間に有意差を認めなかった。Rh123細胞外排泄試験の検討(verapamil非添加)においては、ステロイド依存性症例では、CD3^+細胞中のRh123^+細胞の割合は有意な低値を認めた。すなわち、CD3^+細胞中、Rh123が細胞外へ流出した細胞の割合が有意に高値であった。
他の糸球体疾患における検討では、ANCA関連腎炎においては検討例5例、再発例1例のため統計学的な評価は困難であった。また、IgA腎症においては、臨床的に寛解・再発の区分、すなわちステロイド反応性の区分が困難首あり、他の臨床学的指標が必要であると思われた。
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