| 研究概要 |
実験の前提となる、脱髄型ギラン・バレー症候群の診断を臨床診断および電気生理学的検査により行い、それと平行して脱髄型ギラン・バレー症候群に対比される軸索型ギラン・バレー症候群についても診断を行い、電気生理学的な変化と予後に関し、論文にまとめ公表した(Hiraga A, et al. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2005, Hiraga A, et al. Neurology. 2005)。
同時に本実験を以下のように進めた。
1)ヒト末梢神経よりmRNAを抽出後、逆転写を行いcDNAを得た。
2)cDNAをレトロウイルスベクターに導入し、ヒト末梢神経由来cDNAライブラリーを作製した。
3)上記で得られた脱髄型ギラン・バレー症候群の患者血清を-80℃で保存。
4)脱髄型ギラン・バレー症候群患者急性期血清中の抗体とcDNA発現細胞を反応させた。
5)その後、抗体と結合した細胞すなわち抗原発現細胞をセルソーター、フローサイトメーターにより選別(ソーティング)する予定であり、現在この作業を準備中である。
さらにこれに平行して以下の実験を行った。
1)gliomaのcell lineからcDNAライブラリーを作成した。
2)cDNAをpBluescriptに組み込む。組み替え後、発現した蛋白と患者血清を反応させ、陽性のクローンを単離する。
3)シークエンスにより配列を確認。
4)発現蛋白を抽出後、ELISA法を施行。
以上の実験により数個のクローンを単離し、解析中である。
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