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本研究において「線維タイプ決定シグナル」のスクリーニングは、線維タイプの性質決定に密接に関わる遺伝子(タイプ1線維におけるミオグロビンなど)、各線維タイプで特異的に発現する遺伝子(例えばタイプ2A線維におけるミオシン重鎖IIAアイソフォーム)の転写活性を指標におこなう(例えば、ミオグロビン遺伝子やトロポニンI fast遺伝子の転写活性を促進し、ミオシン重鎖IIA遺伝子の転写活性を抑制するものを「slow fiber switch」候補とする)。この作業を繰り返し、複数の遺伝子において共通したシグナルを探すことにより、候補シグナルを絞り込んでゆく。次に、in vitroの薬理学的実験あるいは遺伝子導入実験により、絞り込まれた候補シグナルにより実際に骨格筋細胞で線維タイプ特異的遺伝子発現が変化するか(すなわち線維タイプスイッチが入るか)否かを確認する。本年度は、すでに準備済みのレポータープラスミド(主に遅筋特異的転写調節レポーター)を用いて線維タイプ決定シグナルの検索を開始するとともに、さらに他の線維タイプ特異的発現遺伝子発現レポーター(主に速筋特異的レポーター)の構築を行った。
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