SUMO化蛋白の凝集現象を応用した抗癌剤のアポトーシス関連標的分子群の解析と創薬

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16590966
• 研究機関: (財)癌研究会
• 研究代表者: 照井 康仁 (財)癌研究会, 癌化学療法センター臨床部, 副部長 (10285786)
• キーワード: SUMO-1 / 抗癌剤 / SUMO foci / アポトーシス / GFP-SUMO-1 / K562 / 分子標的

研究概要

目的:GFP-SUMO-1を強制発現させたヒト白血病細胞株K562(K562/SUMO-1)を作成し、抗癌剤処理によるSUMO化の動態とその意義について検討した。
方法:(1)SUMO-1をpEGFPに組込み、K562にトランスフェクトした。G418による選択的クローニングを行い、ウエスタンブロットと蛍光顕微鏡でGFP-SUMO-1の発現の強いクローンを選択した。(2)各種抗癌剤(TPA、アドリアマイシン、シスプラチン、ミトキサントロン、CPT-11、イマチニブなど)処理による核内Foci形成を共焦点レーザー走査顕微鏡で解析した。(3)PML, Ubc9,PIASなどのSUMO関連蛋白質の発現、局在をウエスタン解析や共焦点レーザー走査顕微鏡にて解析した。
結果:各種抗癌剤処理でGFP-SUMO-1の局在が変化し、その形式から3群に分けられた。GFP-SUMO-1の発現は、TPA処理では、核内で均一に見られ、一方、ミトキサントロン処理では、核内でドットの形成が見られた。K562にGFP-SUMO-1を強制発現させると、TPAやミトキサントロンに対する細胞の感受性が増強し、アポトーシスが誘導された。
結論:抗癌剤のアポトーシス感受性は、SUMO化により増強され、SUMOタンパク質は、癌の分子標的になり得ると思われる。

研究成果

• [雑誌論文] Blockade of bulky lymphoma-associated CD55 expression by RNA interference overcomes resistance to CDC with rituximab. (2006)
  • 著者名/発表者名: Terui Y, Sakurai T, Mishima Y, Mishima Y, Sugimura N, Sasaoka C, Kojima K, Yokoyama M, Mizunuma N, Takahashi S, Ito Y, Hatake K
  • 雑誌名: Cancer Science 97(1) ページ: 72-79
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Differential Regulation of Eotaxin-1/CCL11 and Eotaxin-3/CCL26 Production by the TNF-a and IL-4 stimulated Human Lung Fibroblast. (2006)
  • 著者名/発表者名: Rokudai A, Terui Y, Kuniyoshi R, Mishima Y, Mishima Y, Aizu-Yokota Y, Sonoda Y, Kasahara T, Hatake K
  • 雑誌名: Biol.Pharm.Bull. 29(In press)
• [雑誌論文] Element array by scanning X-ray fluorescence microscopy after cis-diamminedichloro-platinum (II) treatment. (2005)
  • 著者名/発表者名: Shimura M, Saito A, Matsuyama S, Sakuma T, Terui Y, Ueno K, Yumoto H, yamauchi K, Yamamura K, Mimura H, Sano Y, Yabashi M, Tamasaku K, Nishio K, Nishino Y, Endo K, Hatake K, Mori Y, Ishizaki Y, Ishikawa T
  • 雑誌名: Cancer Res 65 ページ: 4998-5002