| 研究課題/領域番号 |
16591036
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| 研究機関 | 高知大学 |
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研究代表者 |
脇口 宏 高知大学, 医学部, 教授 (10116519)
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| 研究分担者 |
前田 明彦 高知大学, 医学部, 助手 (50335931)
黒田 正幸 高知大学, 医学部, 助手 (00253005)
今井 章介 高知大学, 医学部, 教授 (60232592)
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| キーワード | EBウイルス(EBV) / dominant-negative EBNA1 / EBV陽性腫瘍 / 遺伝子治療 |
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| 研究概要 |
EBウイルス(EBV)核蛋白(EBNA1)は感染細胞内での環状EBVゲノム(episome)の複製・維持に必須な唯一のウイルス因子である。本研究では野生型(wt)EBNA1のN末側の大半を欠如する変異体(mtEBNA1)を独自に作製、これがwtEBNA1機能を阻害することにより、感染細胞からEBV episomeを駆逐する分子として働くかどうかを検討し、以下の知見を得た。
1)mtEBNA1をアデノウイルスベクターにてEBVの脱落がモニター可能な人為的EBV陽性変換細胞株(リンパ球系、上皮細胞系)に導入発現させた結果、mtEBNA1が効率的EBV episome脱落促進に機能するdominant-negative(dn)EBNA1であることを確認した。
2)このdnEBNA1がEBV陽性のバーキットリンパ腫(B細胞性)細胞株や、鼻性T/NKリンパ腫、慢性活動性EBV感染症由来のEBV感染T/NK細胞株に対してもウイルスゲノムを追い出し、同時に感染細胞の悪性形質も抑制することをin vitro、in vivoで確認した。
3)dnEBNA1のEBVの脱落促進効果はwtEBNA1のoriP結合に対する競合阻害だけでなく、wtEBNA1転写プロモーター(Qp)近傍に結合してQpを負に制御する結果、wtEBNA1のde novo合成をも低下させるという複数のメカニズムによることを見い出した。
以上の成績から、我々のdnEBNA1が慢性活動性EBV感染症をはじめとする難治性EBV関連疾患に対して特異的に有効な新規の遺伝子治療用分子となる可能性が示された。
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