ヒト表皮角化細胞によるfractalkineとCXCL16の産生機構の解析

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16591103
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 藤山 幹子 愛媛大学, 医学部附属病院, 助手 (60263935)
• 研究分担者: 白方 裕司 愛媛大学, 医学部, 講師 (50226320)
• キーワード: CXCL16 / fractalkine / chemokine / keratinocyte

研究概要

昨年度、われわれは、CXCL16がsheddingをうけて分泌型となり、抗菌活性を示すことを明らかにした。そこで、ヒト表皮角化細胞におけるCXCL16のsheddingに関わる蛋白を種々のinhibitorを用いて解析を行い、CXCL16蛋白の3カ所の異なる部位に対するポリクローナル抗体を作成し、western blotや免疫染色による検討を行った。これらの検討より、ヒト皮膚の表皮では、基底細胞層と有棘細胞層でCXCL16の産生とsheddingの受け方に違いがあることが示唆された。また、sheddingを抑制することの可能なinhibitorを確認した。
fractalkineに関しては、皮膚疾患においての発現を免疫染色で確認し、fractalkineにより誘導されていると考えられる炎症細胞の種類を免疫染色により解析した。fractalkineのレセプターを発現する数種の炎症細胞は、いくつかの炎症性皮膚疾患において強く誘導されており、表皮には炎症細胞浸潤に一致したfractalkineの発現を認めた。これらの所見から、ある種の皮膚疾患の発症機序に、fractalkineが重要な役割を果たしていると考えられた。皮膚疾患において、fractalkineがchemokineとして作用するためには、sheddingを受けることが重要となる。そこで、fractalkineのsheddingについても、inhibitorを用いて解析を行ない、刺激下で産生されるfractalkineのsheddingを抑制しうるinhibitorを確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Bone morphogenetic protein-2 modulates Wnt and frizzled expression and enhances the canonical pathway of Wnt signaling in normal keratinocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Yamasaki K, Shirakata Y, Dai X, Tokumaru S, Yahata Y, Tohyama M, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Dermatological Science (In press)
• [雑誌論文] SOCS1 negative feedback of STAT1 activation is a key pathway in the dsRNA-induced innate immune response of human keratinocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Dai X, Sayama K, Yamasaki K, Tohyama M, Shirakata Y, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Investigative Dermatology (In press)
• [雑誌論文] dsRNA-mediated innate immunity of epidermal keratinocytes. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tohyama M, Dai X, Yamasaki K, Shirakata Y, et al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 335 ページ: 505-511
• [雑誌論文] Microbubble-enhanced ultrasound for gene transfer into living skin equivalents. (2005)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Shirakata Y, Tamai K, Dai X, Hanakawa Y, Tokumaru S, Yahata Y, Tohyama M, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Dermatological Science 40 ページ: 105-114
• [雑誌論文] Induction of keratinocyte migration via transactivation of the EGF receptor by the antimicrobial peptide LL-37. (2005)
  • 著者名/発表者名: Tokumaru S, Sayama K, Shirakata Y, Komatsuzawa H, Ouhara K, Hanakawa Y, Yahata Y, Dai X, Tohyama M, et al.
  • 雑誌名: Journal of Immunology 175 ページ: 4662-4668