| 研究課題/領域番号 |
16591341
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
藤 信明 京都府立医科大学, 医学研究科, 助手 (90332949)
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| 研究分担者 |
上田 祐二 京都府立医科大学, 医学研究科, 講師 (60254356)
山岸 久一 京都府立医科大学, 医学研究科, 教授 (40128723)
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| キーワード | 癌ワクチン療法 / ヘルパーエピトープ / 癌胎児性抗原(CEA) / 消化器癌 / 腫瘍抗原ペプチド |
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| 研究概要 |
平成16年度の研究計画概要に従い研究を進め、以下の結果を得た。
平成16年度
1.腫瘍細胞特異的CD4陽性T細胞の誘導とクローニング(担当;藤、上田)
腫瘍細胞株を用いた腫瘍特異的反応性T細胞の樹立の実験において2つの異なるドナー由来の末梢血単核球から数種類のT細胞ラインを樹立し得た。これらから得た数種類のクローンにおいて、大腸癌特異性の高いクローンを得る目的で、2種類の大腸癌細胞株(Colo205、HT29)に対する交差反応性を有したもの4種類をピックアップした。大腸癌以外の癌細胞株あるいは他の正常組織由来の細胞に対する反応性は現在検討中である。
2.腫瘍細胞由来cDNAライブラリーの作成(担当;藤、上田)
cDNAλファージシステム(λ-ZAP Vector ; Stratagene社)の操作書に従いHT29及びColo205から抽出したRNAを元に50ジーン/プールのcDNAライブラリーを作成した。これをトランスフォームした大腸菌を凍結融解法およびライソザイムでセルライセートとして-80度で保存した。
3.cDNAライブラリーのスクリーニング(担当;藤、上田)
目下、1.で樹立したT細胞のスクリーニングを行っている最中である。現在20から30枚の96ウェルプレートに異なるジーンプールをそれぞれ入れてT細胞の反応性を観察しているが、大腸菌の持つ高い抗原性に由来すると考えられるバックグラウンドを時に高く認めるため、陽性ウェルの判定に困難を見出している。本実験は今後の研究の進行に対して非常にクリティカルな結果をもたらすため、今後実験方法の若干の改変等により効果的なスクリーニング方法を模索する必要性があると考えられる。現在この点について鋭意取り組んでいる最中である。
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