| 研究概要 |
[方法]当科で樹立した食道癌培養細胞株(KEシリーズ,KE-3〜KE-10輸の8種)を用いて以下の検討を行った.1)connexin(Cx)遺伝子,蛋白の発現:RT-PCR, Western blot analysisにて発現を調べた.2)培養細胞株へのCx遺伝子の導入:Cx32遺伝子を導入した.3)ギャップ結合を介する細胞間相互作用(gap junctional intercellular communication以下GJICと略記)の測定:dye transfer assayを用いてGJICの程度をKEでCx遺伝子導入前後で比較した.4)制癌剤感受性試験:制癌剤docetaxelを用いてCx遺伝子導入前後で比較した.
[結果]KEシリーズにおいてKE-10においていずれのCx遺伝子ならびに蛋白の発現を認めず,GJICも全く認めなかったことから,同細胞株にCx32遺伝子をtransfectした.transfectantではCx蛋白発現を認め,良好なGJICを認めた.さらにdocetaxelを用いた感受性試験ではCx導入細胞において親細胞に比較し約30%の効果増強が認められた.
[今後の実験予定]Cx遺伝子導入細胞におけるアポトーシス関連遺伝子ならびに多剤耐性遺伝子(MDR)およびそれらの蛋白発現を調べ,Cx遺伝子導入による制癌剤感受性増強のメカニズム解明を行う.
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