| 研究概要 |
平成16年度は肺癌肺転移微小循環の生体内観察法の確立を目的として、次のような研究を行った。
A,軟X線画像解析装置を用いた肺内肺小血管生体観察法の確立
臓器内小血管を臓器表面から観察することはできない。そこで、造影剤を血管内に注入し、臓器を小焦点軟X線で透視することによって、臓器内小血管の観察を行うことにした。具体的には、ドンリュウラットを腹腔内麻酔し、レスピレーターで換気させ、左胸壁を切除し、右室漏斗部より直径1mmのタイゴンチューブを刺入し、その先端部を肺動脈主幹部までおしすすめ留置する。左肺横隔膜部を肺固定用吸引チャンバーに挿入固定し、インバーター式軟X線発生装置の上におく。軟X線発生装置は出力10〜60kV,0.1〜0.8mAを持ち、0.1mmの微小焦点ベリリウム放射窓特殊X線管より軟X線を放出している。イオパミロン造影剤を肺動脈主幹部より注入し、肺を軟X線で透視すると、肺内小血管像が得られる。さらに、ラットを乗せたステージをX線発生装置に近づけると、約30倍の拡大像が得られる。この画像をX線増倍管で増幅し、増幅した画像を40万画素のCCDカメラで撮像することによって、肺内小血管像を得る。このようにして、肺内に存在する直径100〜600μの肺小血管の生体観察を可能にした。
B,蛍光顕微鏡を用いた肺表面肺微小血管生体観察法の確立
臓器表面の微小血管は蛍光生体顕微鏡などで直視下に観察できる。具体的には、ドンリュウラットを腹腔内麻酔し、レスピレーターで換気させる。次に、左胸壁を切除し、左肺横隔膜部を肺固定用吸引チャンバーに挿入固定し、FITC-albuminやacridine redを静注しながら大型蛍光顕微鏡で観察し、この蛍光血管像を超高感度CCDカメラで撮像する。このようにして、肺表面に存在する直径50μ以下の肺微小血管の生体観察を可能にした。
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