| 研究課題/領域番号 |
16591411
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
渡辺 真純 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (90201227)
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| 研究分担者 |
長谷川 直樹 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20198724)
江口 圭介 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (90232941)
小林 紘一 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (80051704)
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| キーワード | 気管支鏡 / マイクロサンプリング / 気道上皮被覆液 / 肺癌 / プロテオーム解析 / 腫瘍マーカー |
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| 研究概要 |
1)気管文鎮下マイクロサンプリング法による気道上皮被覆液(ELF)の採取と遠心法によるMSブローブからの高濃度ELF回収。
今年度は肺癌臨床症例10例で気管文鎮下MS法によるELFの採取を行った。プロテオーム解析用の高濃度ELFを回収するためスピッツ内に固定したブローブを遠心し5μl程度のELF回収が可能であった。
2)肺癌症例ELFからのプロテオーム解析。
上記により回収したELFの1μlを用いてサイファージェン社プロテインチップシステムによる解析を行った。同法ではチップに捕捉されたタンバクをパルスレーザー照射によってチップ表面からイオン化脱離し飛行させる。飛行時間から質量数とイオン強度を測定する。腺癌症例で腫瘍側と健常側を比較したところ腫瘍側ELFでは陽イオン交換で3460、9280、20800Da付近に健常側では認められないピークを認めた。陰イオン交換では5230kDa付近にピークを認めた。また、6000Da付近に複数のピークを認める症例も存在した。
ELF検体のタンパク質量分析が可能なことが判明したので、得られたピークの同定を行う目的で電気泳動法によるプロテーム解析を開始した。
3)ゲフィチニブ(イレッザ^<TM>投与肺癌症例におけるELF中マーカーの変化による抗腫瘍効果の評価
ゲフィチニブ投与前と投与後2週日の2回に腫瘍近傍などからELFを採取しCEA、KL-6、SP-A、VEGF、IL-8の各項日を測定した。15例中ゲフィチニブの治療効果あり群(9例)と効果なし群(5例)に分けて検討したところ、効果あり群でELF中のCEA、KL-6、SP-Aはいずれも有意に減少、効果なし群で有意に増加していた。一方、血清中ではCEAが効果あり群で減少したが、その他のマーカーは有意な変動を示さなかった。BMS法による解析ではCEA、KL-6、SP-Aはいずれも肺癌の治療効果を鋭敏に反映していた。
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