研究課題/領域番号 |
16591926
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研究機関 | 神奈川歯科大学 |
研究代表者 |
角田 晃 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (70236933)
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研究分担者 |
斎藤 正寛 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (40215562)
寺中 敏夫 神奈川歯科大学, 歯学部, 教授 (60104460)
須田 直人 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (90302885)
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キーワード | エナメル上皮細胞 / 細胞外マトリックス / マラッセ上皮遺残 / 歯胚 / 発生 / 基底膜 / エナメルタンパク質 / 歯根膜 |
研究概要 |
昨年度確立したマラッセ上皮細胞(Mouse Mallase's Epithelial Rest : MMER)の培養条件を確立するため各種培地を用いた培養条件を検討した。まずは上皮細胞専用無血清培地に線維芽細胞増殖因子(fibroblast growth factor : FGF10)を用いて増殖能力を検討した。その結果FGF10添加によりMMERの増殖は維持されることが確認された。そこで同培地を用いて21日間の長期培養を行いエナメル蛋白質であるamelogenin、ameloblastinおよびenamelinの遺伝子発現をRT-PCR法で解析した。その結果、同培地で長期間培養するとenamelinの発現は観察されるものの、amelogeninおよびameloblastinの発現は観察されなかった。一方、秋田大学の杉山らが確立したマウスエナメル芽細胞は血清を含むDulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)でエナメル蛋白質遺伝子の発現を誘導できることを報告している(Biochem Biophys Res Commun. 2003 Sep 5;308(4):834-839.)。そこでMMERを同条件で培養し分化誘導を試みたところ、同培地によりMMERは敷石状の形態を示した。そこでエナメル蛋白質の遺伝子発現をRT-PCR法で解析した。しかし同条件でもenamelinの発現を誘導できるが、amelogeninおよびameloblastinの発現を誘導するには至らなかった。以上の結果よりMMERの分化誘導には上記の条件以外の液性因子あるいは環境因子を必要とすることが判明した。来年度はさらにMMERの分化誘導条件を探索していく予定である。
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