| 研究概要 |
本研究は、新規のRINGフィンガー型ユビキチンリガーゼ(E3)をRINGフィンガーの塩基配列をもとにゲノムデータベースならびにPCRクローニングにより同定し、その基質ならびに機能を明らかにすることを目的とする。ユビキチン-プロテアソームシステムはプロテアソームにおいてポリユビキチン修飾された蛋白を分解するシステムで、蛋白発現調節・細胞周期進行・癌化・生体機能制御において重要な役割を果たしており、このシステムの破綻は内分泌疾患・癌・神経変性疾患などの病態をもたらすことが明らかにされつつある。ユビキチンを結合させるための酵素であるE3にはHECT型、RINGフィンガー型、U-box型の3つのタイプがある。我々は最近エストロゲン応答性のRINGフィンガー蛋白Efpが、細胞周期進行を抑制する14-3-3σを選択的に蛋白分解するE3であることを突き止め、Efpが乳癌の増悪因子であることを発見した。本研究において,Efpの基質としての14-3-3σが難治性のホルモン療法不応性乳癌や、前立腺癌、卵巣癌においてもその蛋白レベルが減少していることを明らかにした。また、RINGフィンガータイプのE3と考えられるcDNAを複数クローニングし、それらRINGフィンガー蛋白遺伝子をベイトとした酵母2-ハイブリッド法を行い、結合する蛋白を同定した。そして、RINGフィンガー蛋白遺伝子とその結合蛋白遺伝子を哺乳類細胞に発現させ、蛋白-蛋白相互作用を確認した。
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