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今年度、DNAアルキル化能と配列認識能を両立した反応性Py(N-メチルピロール)-Im(N-メチルイミダゾール)ポリアミドを特定遺伝子発現制御ツールとして実用化するために、特定遺伝子機能制御に関する機能評価を進めた。加えて、Fmoc固相合成の確立によって、十分な量の反応性Py-Imポリアミドを合成供給することが可能になった。
様々な配列認識能を有する反応性Py-Imポリアミドを合成し、塩基配列特異的アルキル化が遺伝子機能(mRNAへの転写、蛋白質への翻訳)に与える影響をヒトがん細胞系にて評価・検討を進めた。その結果、mRNA発現に共有されている遺伝子プロモーター領域のみに限らず、タンパク質の遺伝情報が集約されているコード領域中のユニーク配列を標的とすることに成功した。さらに、配列特異的アルキル化の設定によって特定がん細胞を標的とする細胞増殖阻害活性を変化させることができる可能性を示した。特に、2種類の異なる配列認識能をもつ反応性Py-Imポリアミドに対して、RT-PCRを用いて遺伝子発現に与える影響を解析した結果、コード領域中に標的とするユニーク配列を有する遺伝子に関して、配列特異性の差異に由来する興味深い遺伝子の抑制を観察することに成功した。
現在、固相合成に関する技術を基盤として、10塩基対を超える配列認識能をもつ反応性Py-Imポリアミドの合成供給も可能になってきている。10塩基対配列認識能をもつ反応性Py-Imポリアミドによって生体内の特定塩基配列を精密に標的化・遺伝子制御する技術の実用化を目指して、ラットやマウスへの生物学的応用研究を進めている
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