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1.HSP47結合に重要なコラーゲン上のファーマコフォア位置の同定
HSP47との結合に必要なアルギニン残基(第一ファーマコフォア)を中心部分にもち、かつ、さまざまな位置に光反応性アミノ酸(Bpa)を組み込んだコラーゲンペプチドを用いて、HSP47のフォトアフィニティーラベリングを行った。その結果、アルギニン残基の3残基N末端側のアミン酸残基が、HSP47により直接認識されていることが強く示唆された。以下このアミノ酸残基位置を第二ファーマコフォア位置と称する。
2.第二ファーマコフォアの必要構造
第一ファーマコフォアにアルギニンを持ち、第二ファーマコフォアをさまざまなアミノ酸に置換したコラーゲンモデルペプチドを種々合成し、HSP47との結合を検討した。その結果、第二ファーマコフォアとして、4-ヒドロキシプロリン、プロリン、スレオニン、セリン残基が優れていることが明らかになった。逆に、この位置に荷電を有するアミノ酸を導入するとHSP47との結合は消失した。
3.第一および第二ファーマコフォア構造を持つヘテロ3本鎖型コラーゲンモデルの合成
コラーゲン3本らせん上の第一および第二ファーマコフォアの相対的位置関係を明らかにするために、ヘテロ3本鎖型コラーゲンモデルの合成に着手した。すでに我々は、位置選択的ジスルフィド結合形成によるヘテロ3量体コラーゲンモデルの合成法を報告しているが、さらに効率よく構造活性相関研究を行うために、合成ルートの簡略化を試みでいる。
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