骨髄細胞の細胞表面態鎖改変による肝細胞分化誘導と肝細胞移植療法の開発

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 16700356
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 伊勢 裕彦 信州大学, 大学院・医学研究科, 助手 (10324253)
• キーワード: 肝細胞 / 糖鎖 / 細胞療法

研究概要

骨髄細胞のシアリダーゼ処理による細胞表面のガラクトース露出を蛍光標識ガラクトース結合タンパク(レクチン)のFACS解析で検討したところ,骨髄細胞表面においてガラクトース末端を持つ糖鎖が存在していることが明らかになった.このアシアロ化骨髄細胞を細胞膜染色物質PKH26で染色し,これを正常ラットに尾静注で投与したところ,処理された多くの骨髄細胞が肝臓に集積していることを明らかにした.次に代謝性肝疾患モデルラット(LECラット:ウイルソン病のモデルラット)にシアリダーゼ処理を行ったアシアロ化骨髄細胞を尾静注にて投与を行った.その結果,骨髄細胞由来の肝細胞の出現を確認することができた.そして血清のセルロプラスミンの活性わずかではあるが,改善傾向が確認された.さらに骨髄細胞由来の肝細胞が細胞融合かもしくは分化転換で出現したのか確認するために,骨髄細胞はアルブミンを発現するとDsRed(蛍光物質;赤)を発現するDsRed-Albumin promoterラットからのものを採取し,EGFP(蛍光物質;緑)を恒常的に発現する肝細胞と共培養を行った.その結果,培養条件下においてEGFPとDsRedを同時に発現している肝細胞の出現が認められ,骨髄細胞と肝細胞は細胞融合していることが明らかになった.以上のことから骨髄細胞表面にガラクトース末端を持つ糖鎖を出現させることで効率よく肝臓に集積させることができ,さらに骨髄細胞由来の肝細胞を出現させることに成功した.

研究成果

• [雑誌論文] Development of liver regenerative therapy using glycoside-modified bone marrow cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Misawa R, Ise H, Takahashi M, Morimoto H, Kobayashi E, Miyagawa S, Ikeda U.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 342(2) ページ: 434-440
• [雑誌論文] Collagen synthesis is required for ascorbic acid-enhanced differentiation of mouse- embryonic stem cells into cardiomyocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Sato H, Takahashi M, Ise H, Yamada A, Hirose S, Tagawa Y, Morimoto H, Izawa A, Ikeda U.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 342(1) ページ: 107-112
• [雑誌論文] Changes in cardiac lipid metabolism during sepsis : the essential role of very low-density lipoprotein receptors. (2006)
  • 著者名/発表者名: Jia L, Takahashi M, Morimoto H, Takahashi S, Izawa A, Ise H, Iwasaki T, Hattori H, Wu KJ, Ikeda U.
  • 雑誌名: Cardiovasc Res. 69(2) ページ: 545-555
• [雑誌論文] Liver regenerative therapy using glycoside-modified bone marrow (2005)
  • 著者名/発表者名: 伊勢裕彦, 高橋将文, 池田宇一
  • 雑誌名: 日本臨床 63(12) ページ: 2229-2236
• [雑誌論文] Interleukin-1 beta attenuates beta-very low-density lipoprotein uptake and its receptor expression in vascular smooth muscle cell (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M, Takahashi S, Suzuki C, Jia L, Morimoto H, Ise H, Iwasaki T, Hattori H, Suzuki J, Miyamori I, Kobayashi E, Ikeda U.
  • 雑誌名: J Mol Cell Cardiol. 38(4) ページ: 637-646
• [雑誌論文] Human amniotic mesenchymal cells have some characteristics of cardiomyocytes. (2005)
  • 著者名/発表者名: Zhao P, Ise H, Hongo M, Ota M, Konishi I, Nikaido T.
  • 雑誌名: Transplantation. 79(5) ページ: 528-535
• [産業財産権] 肝臓集積性細胞 (2003)
  • 発明者名: 池田 宇一, 高橋 将文, 伊勢 裕彦
  • 権利者名: 信州大学
  • 公開番号: 特開2005-118005
  • 出願年月日: 2003-10-20