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カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(KSHV)は感染後、潜伏感染関連核抗原(LANA)を発現する。LANAは宿主細胞の核内においてウイルスDNA保持と複製、感染細胞がん化を行なう。我々はLANAの翻訳後修飾を解析する目的で、LANAのプロテオーム解析を行ない、LANAはSUMO1化修飾を受けること、またプロセシングを受けることを明らかにした。そこで、本申請研究では、LANAの翻訳後修飾の機構と生理的役割を解析した。
LANA分子をN末端部、中央部、C末端部に分けて発現させSUMO化修飾を受けるか否か解析したところ、LANAはC末端部のみでSUMO化を受けていた。そこで、C末端領域に存在する15箇所のLys残基に関して、個々の点変異体を作製し、それぞれのSUMO化を解析した。その結果、2箇所のSUMO化部位を同定した。LANAのSUMO化修飾の機能的意義を解析したところ一箇所のSUMO化がbata-カテニンを介するWntシグナルの活性化に必要であることが明らかとなった。
一方で、LANAはC末端領域においてプロセシングを受けることにより約24kDaのC末端断片を生じることを見出した。このC末端断片に対する抗体を作製し、このC末端断片は細胞質に局在することが明らかとなった。さらに、MALDI-TOF/MSを用いたC末端断片に対する結合タンパク質の網羅的解析により、複数の新規LANA結合タンパク質を同定した。いずれの結合タンパク質も、細胞質におけるbeta-カテニンの安定性に影響を与えうる分子であり、これらの分子とLANAのC末端断片の機能的相互作用を解析することにより、KSHVによるLANAを介した未知の発がんメカニズムが解明されるものと期待される。
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