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2004 年度 実績報告書

再生心筋移植に随伴する致死的不整脈発生機序解明と、その不整脈源性のコントロール

研究課題

研究課題/領域番号 16790437
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

三好 俊一郎  慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10296577)

キーワードDi-4ANEPPES / 移植 / 細胞シート / 不整脈 / 活動電位 / 電気的同期 / 横紋構造 / ギャップ結合
研究概要

ラット心筋培養細胞を用いた細胞シートを作製、まずIn vitroで、2枚のシートを重ね合わせることによって、電気的な結合が生じることを観察した。実験は、膜電位感受性色素Di-4ANEPPESを用い、活動電位の伝搬を可視化して確認した。シート同士の電気的な結合は我々のin vitroの条件では2-3日で完成が確認出来たが、免疫組織科学的な検討では、Nude Ratの皮下に移植した細胞シートに比較して、in vitroでは5-6日経過すると、横紋構造などが疎となり、萎縮傾向を示していたことから、in vitroでの長期培養に限界を感じ、予定を変更して、ラット下心筋培養細胞を用いた細胞シートを、Nude ratの心臓に移植、ホストとの電気的な同期現象を観察することとした。観察はin vitroと同様に膜電位感受性色素Di-4ANEPPESを用い、細胞シート移植片と、Hostとの電気的な結合を目視にて確認した。またプログラム刺激法を用いて、細胞シート移植によるホストに不整脈が生じないことを確認してきた。移植した心筋シートが、ホスト上で生着しているかどうかを免疫組織学的な検討を行った。すなわち心筋シートをマーキングし移植、移植後に免疫組織学的な検討を行い、Coforcal Laser顕微鏡を用いて、移植片の組識学的な検討を行った。その結果、移植片は一週間後も移植した局所に生着し、1週間ほどの経過で血管新生が生じ、明瞭な横紋構造・ギャップ結合を有することを明らかにし、本移植片が十分生体内で機能していることを確認した。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2005 2004

すべて 雑誌論文 (6件)

  • [雑誌論文] A new method for manufacturing cardiac cell sheets using fibrin-coated dishes and its electrophysiological studies by optical mapping2005

    • 著者名/発表者名
      Y.Itabashi, S Miyoshi et al.
    • 雑誌名

      Artificial Organs (In press)

  • [雑誌論文] 心筋再生と電気現象 再生医療における不整脈2004

    • 著者名/発表者名
      三好俊一郎, 小川聡他
    • 雑誌名

      心電図 24(Suppl3)

      ページ: 15-28

  • [雑誌論文] 【不整脈起源とそのコントロール】再生医療と不整脈2004

    • 著者名/発表者名
      三好俊一郎
    • 雑誌名

      Molecular Medicine 41(7)

      ページ: 865-869

  • [雑誌論文] Autoimmunity against the second extracellular loop of Beta1-adrenergic receptors induces early afterdepolarization and decreases in K-channel density in Rabbit2004

    • 著者名/発表者名
      Y.Fukuda, S.Miyoshi et al.
    • 雑誌名

      J Am Collage Cardiol 43

      ページ: 1090-1100

  • [雑誌論文] Leukemia inhibitory factor activates cardiac L-type Ca2+ channels via phosphorylation of serine 1829 in the rabbit Cav1.2 subunit2004

    • 著者名/発表者名
      E Takahashi, S Miyoshi et al.
    • 雑誌名

      Circ Res 94(9)

      ページ: 1242-1248

  • [雑誌論文] Can the life span of human marrow stromal cells be prolonged by bmi-1, E6, E7, and/or telomerase without affecting cardiomyogenic differentiation?2004

    • 著者名/発表者名
      Y.Taeda, S.Miyoshi et al.
    • 雑誌名

      J Gene Med 6(8)

      ページ: 833-845

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公開日: 2006-07-12   更新日: 2016-04-21  

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