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本研究は、Porphyromonas gingivalisによる歯肉上皮細胞への侵入機構を明らかにすることを目的として、本細菌の侵入にかかわる宿主細胞のタンパク質分子の動態を探索しようとするものである。
本年度は以下の結果が得られた。1.P.gingivalis線毛は、菌体から器械的操作により剥離し、硫安分画後、DEAE-セファロースカラムを用いて精製した。2.P.gingivalisの歯肉上皮細胞への侵入は、抗ICAM-1ポリクローナル抗体および脂質カベオラ構造障害薬であるメチルβシクロデキストリンにより濃度依存的に抑制された。3.P.gingivalis線毛とリコンビナントICAM-1は、濃度依存的に結合がみられた。4.P.gingivalisの歯肉上皮細胞への侵入を蛍光顕微鏡および共焦点レーザー顕微鏡を用いて検討したところ、P.gingivalisと歯肉上皮細胞のICAM-1のco-localizationがみられた。5.メチルβシクロデキストリンにより、4.でみられたco-localizationが抑制された。
現在、siRNA法による歯肉上皮細胞のICAM-1およびcaveolin-1をノックダウンし、P.gingivalisの歯肉上皮細胞への侵入におけるこれら細胞分子のかかわりについて検討を進めている。
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