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2017 年度 実績報告書

過大圧縮応力が軟骨組織に及ぼす影響の解明と軟骨疾患発症メカニズムの検証

研究課題

研究課題/領域番号 16F16057
研究機関東京大学

研究代表者

牛田 多加志  東京大学, 大学院工学系研究科(工学部), 教授 (50323522)

研究分担者 HUANG WENJING  東京大学, 工学(系)研究科(研究院), 外国人特別研究員
研究期間 (年度) 2016-04-22 – 2018-03-31
キーワード過大圧縮応力 / 軟骨組織 / 細胞死
研究実績の概要

軟骨組織内の死細胞の分布のメカニズム、過大圧縮応力のひずみ速度と軟骨の力学特性変化との関係、死細胞の分布と軟骨の構造変化との関係を解明することを目的とし、研究を実施した。圧縮実験装置に位置ずれの補正機能を実装しているため、リアルタイムイメージングが可能となった。軟骨組織内に不均一に分布している細胞死を説明するために、ひずみ速度をコントロールしながら過大応力を負荷し,対応する軟骨組織内の局所ひずみをreal-timeで観察し、局所ひずみと死細胞分布との関係を調べた。また,過大圧縮応力が軟骨組織の力学特性に及ぼす影響を評価するために、応力緩和実験を行った。異なるひずみ速度で圧縮した試験片を約24時間培養した後、応力緩和実験を行った。40%/minのひずみ速度で圧縮し,ひずみが最大値の20%に達した後は600秒間試験片のひずみを保ち,応力の時間経過を記録した。応力緩和曲線の時系列データに、粘弾性モデルをフィッテイングさせ、各パラメータの値を求めた。さらに,軟骨の構造変化を評価するために、組織染色を行った。凍結ブロックを凍結ミクロトームで切断し,厚み10μmの凍結切片を作製した。軟骨の構成成分は、水分、コラーゲンⅡ、プロテオグリカンの順で多くを占めている。そのため、本研究では、抗体染色でコラーゲンⅡを、トルイジンブルー(TB)染色でプロテオグリカンの変化を調べた。従来の研究から、表層は軟骨の構造、機能、力学特性などを維持する役割を果たすということが知られていた。さらに、軟骨表層の伸展及び圧縮特性が作用するひずみ速度に依存することも知られていた。そのため、本研究では、表層、中層、深層の全体を含む試験片と、表層(軟骨全体の深さの10%)を取り除いた試験片を用い、圧縮する時の局所変形と圧縮された後の死細胞の分布を比較し、軟骨内死細胞の分布における表層の役割を調べた。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Strain Rates of Excessive Stress Loading Regulate Local Distribution of Damaged Chondrocytes in Porcine Articular Cartilage.2018

    • 著者名/発表者名
      Wenjing Huang, Warner Mia, Hikaru Sasaki, Katsuko S. Furukawa, Takashi Ushida
    • 雑誌名

      Journal of Orthopaedic Research

      巻: 印刷中 ページ: -

    • 査読あり
  • [雑誌論文] An angiogenesis platform using a cubic artificial eggshell with patterned blood vessels on chicken chorioallantoic membrane2017

    • 著者名/発表者名
      Wenjing Huang, Makoto Itayama, Fumihito Arai, Katsuko S. Furukawa, Takashi Ushida, Tomohiro Kawahara
    • 雑誌名

      PLOS One

      巻: 12(4) ページ: -

    • DOI

      https://doi.org/10.1371/journal.pone.0175595

    • 査読あり
  • [学会発表] 過大圧縮応力が軟骨細胞・組織に及ぼす影響に関する研究2018

    • 著者名/発表者名
      佐々木 光, 黄 文敬, 牛田多加志, 古川克子
    • 学会等名
      日本機械学会第57回学生員卒業研究発表講演会
  • [学会発表] Patterns of cell death in porcine articular cartilage exposed to excessive stress.2017

    • 著者名/発表者名
      黄文敬, Mia Warner, 佐々木光, 古川克子, 牛田多加志
    • 学会等名
      第44回日本臨床バイオメカニクス学会
  • [学会発表] 過大応力負荷に対する関節軟骨の応答2017

    • 著者名/発表者名
      黄 文敬, Warner Mia, 佐々木 光, 古川 克子, 牛田 多加志
    • 学会等名
      日本機械学会第30回バイオエンジニアリング講演会

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公開日: 2018-12-17  

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